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  • 小鼠白细胞介素12 ELISA试剂盒(Mouse IL-12/23(P40) ELISA KIT)

    产品货号: M6142S/M6142M/M6142L

    产品规格: 24T/48T/96T

    目录价(元):952/1587/2698

    推荐仪器:酶标仪

    大包装询价


产品概述:

储存条件
4℃避光保存,有效期见外包装。开封后,保存温度详见说明书。

组分

24T

48T

96T

使用方法

开封后保存条件

A. 标准品

1000 pg

1000 pg

1000 pg

按说明书进行稀释

-20℃可存放一月

B. 标准稀释液

16 mL

16 mL

16 mL

即用型

4可存放一月

C. 浓缩生物素化抗体(100×

30 μL

60 μL

2×60 μL

按说明书进行稀释

(现配现用)

D. 生物素化抗体稀释液

16 mL

16 mL

16 mL

即用型

E. 浓缩酶结合物(避光 100×

30 μL

60 μL

2×60 μL

按说明书进行稀释

(现配现用)

F. 酶结合物稀释液

16 mL

16 mL

16 mL

即用型

G. 浓缩洗涤液(20×

16 mL

16 mL

25 mL

即用型

H. 显色剂(避光)

6 mL

6 mL

12 mL

即用型

I. 终止液

12 mL

12 mL

12 mL

即用型

4或常温保存

J. 预包被96孔板

8×3

8×6

8×12

即用型

密封干燥4保存

K. 封板胶纸

1

2

4

即用型

终止液和显色剂具有腐蚀性,一旦接触到液体,请尽快用大量清水冲洗。


产品介绍
Mouse IL-12/23 (p40) ELISA Kit (Mouse Interleukin-12/23 (p40) Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay Kit) ,即小鼠白细胞介素 12 ELISA 试剂盒,可以定量检测小鼠血清、血浆或细胞培养上清液等样本中的天然和重组 IL-12/23 (p40)浓度。

白细胞介素 12,也称为自然杀伤细胞刺激因子或细胞毒性淋巴细胞成熟因子,是一种多效性细胞因子,主要由活化的巨噬细胞、树突状细胞和中性粒细胞产生,有致炎作用和免疫调节作用。
IL-12 的是由二硫键相连异源二聚体,70 kDa (p70)的异二聚体糖蛋白由 40 kDa (p40)和 35 kDa (p35)两个亚基组成。p40 和 p35 亚基没有 IL-12 的活性,但 p40 同型二聚体可与 IL-12 的受体结合,是 IL-12 的拮抗剂。IL-12 等电点为 pH4.5-5.5。小鼠 IL-12 P35 有 193 个氨基酸残基,与人 IL-12 P35 有 66%同源性,小鼠 P40 有 313 个氨基酸残基与人 P40 有 70%同源性。鼠 IL-12 对人类和小鼠细胞均有活性,人IL-12 作用有种属特异性,人 IL-12 对小鼠细胞作用甚微。IL-12 的生物学功能包括体外效应和体内效应。体外效应:IL-12 能诱导 PHA 刺激的 T 细胞增殖。IL-12 能增加 CD56 +NK 细胞的活性;诱导 NK 细胞或 PBMC 增殖和产生 LAK 活性,增加 NK 细胞表达表面分子;促进 NK 细胞产生 IFN-γ 和 TNF-α(TGF-β和 IL-10 抑制该效应)。IL-12 在 BCG 和 LPS 诱导的小鼠炎性休克所致的死亡中起重要作用。IL-12 通过诱导 TNF-α和 IFN-γ,抑制骨髓造血。IL-12 还有抗血管生成作用。体内效应:将 IL-12 输入动物体内可以增强 NK 细胞的杀伤活性、增加 IFN-γ分泌、启动造血细胞大量生成、增强异体排斥反应并可能介导抗肿瘤效应。IL-12 在某些 Th1 介导的自身免疫疾病中起重要作用。IL-12 诱导动物脾肿大,其中含有大量造血细胞,红细胞系、髓样细胞系和巨核细胞系都增加。IL-2 抑制骨髓造血的作用可能与诱导 NK 细胞产生 IFN-γ等有关。在小鼠肿瘤模型中,IL-12 的抗肿瘤作用依赖 IFN-γ的增加,且与 IL-2、IFN-α以及一些化学治疗药物有协同抗肿瘤作用。IL-12 发挥生物学效应所需的细胞因子浓度很低(≤pM), 与合适剂量 IL-2 联合应用可降低 IL-2 用量,同时提高 CTL、NK、LAK 的杀伤活性,因此 IL-12 可能成为一种新的抗肿瘤生物制剂。
本试剂盒采用双抗体夹心 ELISA 法检测样品中小鼠 IL-12/23 (p40)浓度。在小鼠 IL-12/23 (p40)单克隆抗体预包被酶标板中加入适度稀释的样品和标准品,其中的 IL-12/23 (p40)会与其单抗结合,洗去游离成分;加入生物素化的抗小鼠 IL-12/23 (p40)抗体,抗小鼠 IL-12/23 (p40)抗体与结合在单抗上的小鼠 IL-12/23 (p40)结合而形成免疫复合物,洗去游离的成分;加入辣根过氧化物酶标记的亲合素,生物素与亲合素特异性结合,洗去未结合的酶结合物;加入显色剂,若反应孔中有 IL-12/23 (p40),辣根过氧化物酶会使无色的显色剂出现蓝色;加终止液变为黄色。在 450 nm 下测 OD 值,小鼠 IL-12/23 (p40)浓度与 OD 450 值之间呈正比,可通过绘制标准曲线计算出样品中小鼠 IL-12/23 (p40)浓度。

说明书:


 UE-M6142S/M6142M/M6142L    

常见问题解答:


背景信号强是什么原因?
1.洗板不充分。将洗涤缓冲液加入孔中洗涤,确保孔区域洗涤充分;确保已在洗涤前弃去所有残留抗体溶液;增加洗涤次数。
2.链亲和素-HRP结合物过量。检查偶联物的稀释度,在推荐的稀释度下使用。
3.封闭不充分。检查封闭液;延长封闭时间。
4.孵育时间过长。缩短孵育时间。
5.样品或标准品中含干扰物质。设置对照。
6.缓冲液受污染。新鲜配置缓冲液。

没有信号?
1.试剂添加顺序错误或试剂配制不正确。重复实验;检查试剂配制方法;复核试验试剂添加流程。
2.HRP被叠氮化合物污染。使用新鲜配制的试剂。
3.抗体用量不足。检查是否使用了推荐的抗体量;增加抗体用量(浓度)。
4.使用了含胎牛血清的缓冲液复溶抗体。检查使用的试剂。
5.捕获抗体与板结合较差。使用ELISA板,而非组织培养板;使用不含其他杂蛋白的PBS溶解抗体。
6.缓冲液受污染。新鲜配置缓冲液。

整块板呈现规则蓝色?
1.洗板不充分或跳过洗涤步骤未去除残留的非结合过氧化物酶。严格按照说明书洗涤流程操作。
2.底物溶液预混太早不新鲜。底物溶液混合后须立即使用。
3.封板胶纸或试剂储液槽重复使用导致HRP残留污染。每步均需使用新的封板胶纸或试剂储液槽。
4.缓冲液有金属或HRP污染。新鲜配置缓冲液。

标准曲线差?
1.链亲和素-HRP结合物量不足。检查倍性稀释是否正确。
2.捕获抗体与板结合较差。使用酶标板,而非组织培养板;使用不含其他杂蛋白的PBS溶解抗体。
3.检测抗体量不足。检查稀释度是否正确。
4.孵育时间不足。延长底物溶液孵育时间。
5.实验操作流程有误。严格按照说明书操作流程。
6.标准曲线稀释计算错误。重新计算制作新的标准曲线。

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