产品货号：MAG-FP-DNA-50，MAG-FP-DNA-250

产品规格：50 rxns、250 rxns

运输条件：常温运输；

保存条件：PK Soln 2-8℃保存12个月，-20℃长期保存，其它组分室温保存12个月。

应用范围：适用于生食、深加工食品、动物饲料或药品中DNA提取。

产品组分

注：

1）若使用前Buffer PTL有沉淀，需在60℃下温育溶解后使用；

2）Buffer AW1为浓缩溶液，使用前请按照瓶身标签提示加入无水乙醇进行稀释。

产品介绍

本制品适用于各种生食、深加工食品和动物饲料等样本中提取DNA。试剂盒采用了磁性纳米颗粒固相核酸富集技术，精选高性能纳米磁珠，配合精心研制的Buffer体系组合而成。该试剂盒结合了硅胶膜的选择性结合特性，可用于深度加工食品中纯化经过高压、辐照或热处理等高度碎片化（100~200 bp）的DNA回收，应用于检测转基因生物，过敏原和植物以及食品、饲料或药品中的动物物质。本试剂盒最大限度地减少复杂食物样品中固有的PCR抑制剂的污染，纯化所得DNA可适用于可以直接用于酶切、PCR、RT-PCR、NGS等下游分子生物学实验。

适用仪器

适用于基于磁转移技术的32位或96位核酸提取仪。如BIO-DL 32，TIANGEN TGuide S32，TIANLONG NP968-C，Rosetta 96等自动化核酸提取仪，也适用于手动提取。

操作步骤

一．首次使用前：

自备试剂：无水乙醇（AR）、异丙醇（AR）、80%乙醇。 

二．样品前处理：

A.  生食类动物源性食品

1.将小于30 mg的生食类动物源性食品样本转移到2 mL离心管中。

2.加入25 μL PK Soln和300 µL Buffer PTL，高速涡旋10秒，60℃振荡温浴30~60分钟至溶解，短暂离心。

3.加入300 μL Buffer AL，高速涡旋10秒。

4.加入350 μL异丙醇和15 µL MB Mix，室温振荡涡旋10分钟。短暂离心，按【纯化步骤】继续进行后续操作。

B.  深加工食品

1.用合适的方法均质化食品样本，转移100~200 mg至2 mL离心管中。

注：例如，对于固体食品样本，使用液氮研磨成粉末；对于半固体样本，14,000×g离心5分钟收集沉淀，吸弃上清液。

2.加入25 μL PK Soln和1 mL Buffer PTL，高速涡旋，60℃振荡温浴60分钟。

注：根据样本类型或样本量适当调整裂解液的加入量，确保在下一步中取到500 μL的澄清液。

3.冰上冷却3分钟，14,000×g离心5分钟，吸取500 μL上清液至新的2 mL离心管中，加入500 μL Buffer AL，涡旋混匀，70℃振荡温浴10分钟。

注：例如，若后续选择自动化核酸提取仪进行操作，请转移上述裂解上清液至Sample Plate。

4.加入600 μL异丙醇和15 µL MB Mix，室温振荡涡旋10分钟。短暂离心，按【纯化步骤】继续进行后续操作。

C.  复杂深加工食品

1.用合适的方法均质化食品样本，转移100~200 mg至2 mL离心管中。

注：例如，对于固体食品样本，使用液氮研磨成粉末；对于半固体样本，14,000×g离心5分钟收集沉淀，吸弃上清液。

2.加入25 μL PK Soln和1 mL Buffer PTL，高速涡旋，60℃振荡温浴60分钟。

注：根据样本类型或样本量适当调整裂解液的加入量，确保在下一步中取到500 μL的澄清液。

3.冰上冷却3分钟，14,000×g离心5分钟，转移上清液（600~800 μL）至含有700 μL氯仿溶液的2 mL离心管，高速涡旋30秒。

4. 14,000×g离心2分钟，转移500 ul上清液到新的2 ml离心管，加入500 μL Buffer AL和600 μL异丙醇和15 µL MB Mix，室温振荡涡旋10分钟。短暂离心，按【纯化步骤】继续进行后续操作。

三．纯化步骤:手动法

1.短暂离心，将离心管内液体收集至底部，然后将离心管置于磁力架上静置30秒。待磁珠完全吸附后，用移液器吸弃管内液体。

2.向离心管中加入700 µL Buffer AW1，1,000 rpm涡旋振荡3分钟，磁性分离，吸弃上清液。

3.向离心管中加入700 µL 80%乙醇（现配），1,000 rpm涡旋振荡2分钟，磁性分离，吸弃上清液。

4.重复上述步骤3一次。

5.将离心管继续保持在磁力架上，放入45~50℃烘箱中，干燥约10分钟至无明显乙醇气味（也可室温晾干，但需要更长时间）。

6.向离心管中加入50~100 μL Buffer EB，吹散或振散磁珠，58℃振荡温浴5~10分钟。磁性分离，将洗脱液转移至另一干净离心管中，得DNA产物，保存于-20℃。

四．纯化步骤: 96位核酸提取仪For B.深加工食品

1.在Sample Plate (1)中加入300 μL 异丙醇和15 μL MB Mix；

2.在Sample Plate (2)中加入300 μL 异丙醇；

3.在Sample Plate (1)和Sample Plate (2) 分别加入500 μL裂解上清液；

4.将96位磁棒套放入到Wash 2 Plate中（必须准确放入，否则可能损坏磁棒套。此步骤为针对KingFisher Flex，若使用其它品牌仪器请做相应调整）。

5.将试剂板按对应顺序放入核酸提取仪中，运行程序。

6.程序运行完毕，转移Elute Plate中DNA至新离心管中，提取过程结束。

【96位核酸提取仪建议程序参数】

注：不同核酸提取仪参数可根据实际情况进行调整。