产品介绍

产品货号：T6179S/T6179L

产品规格：50 T

储存条件：-20℃保存，组分A需避光，避免反复冻融。有效期见外包装。冰袋运输。

应用范围：细胞凋亡检测。

产品介绍

细胞发生凋亡时，会激活一些DNA内切酶，这些内切酶会切断核小体间的基因组DNA，产生180 bp-200 bp的DNA片段，表现为琼脂糖凝胶电泳中呈现的特异的梯状Ladder图谱。基因组DNA双链或单链断裂时会出现产生大量的粘性3'-OH末端，可在脱氧核糖核苷酸末端转移酶（TdT）的催化作用下，与YF® -dUTP结合，从而通过荧光显微镜或流式细胞仪直接进行凋亡细胞的检测，这类方法称为脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法（Terminal - deoxynucleotidyl transferase mediated nick end labeling, TUNEL）。由于正常的或正在增殖的细胞几乎没有DNA的断裂，因而没有3'-OH形成，很少能够被染色。Tunel法可以对完整的单个凋亡细胞核或凋亡小体进行原位染色，能准确地反应细胞凋亡典型的生物化学和形态特征，可检测出极少量的凋亡细胞，因而在细胞凋亡的研究中广泛采用。

本试剂盒应用范围广，可用于检测冷冻或石蜡切片中的细胞凋亡情况，也可检测培养的贴壁细胞或悬浮细胞的凋亡情况。可选择性的检测凋亡细胞，而非坏死细胞或因辐照和药物治疗而造成的DNA链断裂的细胞。本试剂盒检测细胞凋亡，耗时短，只需一步染色反应，洗涤后即可检测。

使用方法

实验材料（自备）

1. PBS缓冲液（1×，pH~7.4）

2. 0.4% Triton X-100（PBS配制）

3. 0.1% Triton X-100（PBS配制，其中含5 mg/mL BSA）

4. 4%多聚甲醛（PBS配制）

1. 抗荧光淬灭剂

2. ddH2O

实验设计

A. 阳性对照

DNase I处理制备阳性对照载玻片。DNase I可以消化单链或双链DNA暴露3'-OH末端，人为造成细胞凋亡。每次实验做一次即可。（用来验证本次实验操作和试剂盒有无问题）

B. 阴性对照

使用不含TdT Enzyme的TUNEL Reaction Buffer，用ddH2O替代TdT Enzyme。（主要是排除细胞自身凋亡、操作过程等原因导致的非特异性染色；以及调整拍摄曝光强度。）

C. 实验处理组

实验组按照说明书正常操作。

D. 实验对照组

实验组按照说明书正常操作。