产品介绍

产品货号：T6068S/T6068L

产品规格：20 T/50 T

储存条件：-20℃保存，有效期见外包装

产品内容：

注：（1）组分A、C、E、F需避光保存。（2）组分B、C、H、I请注意冰上操作。（3）组分F避免反复冻融，建议分装保存。（4）使用前请将产品瞬时离心至管底，再进行后续实验。

产品介绍

细胞发生凋亡时，一些DNA内切酶被激活，这些内切酶会切断核小体间的基因组DNA，产生180 bp-200 bp的DNA 片段，断裂的DNA片段暴露出大量的粘性3'-OH末端，可在脱氧核糖核苷酸末端转移酶（TdT）的催化作用下，与生物素（Biotin）-dUTP结合，随后和辣根过氧化物酶（HRP）标记的Streptavidin（Streptavidin-HRP）结合，最后在HRP的催化下通过DAB显色来显示凋亡细胞，从而通过光学显微镜直接进行凋亡细胞的检测，这类方法称为脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法（Terminal-deoxynucleotidyl transferase mediated dUTP nick end labeling, TUNEL）。

本试剂盒应用范围广，可用于检测冷冻或石蜡切片中的细胞凋亡情况，也可检测培养的贴壁细胞或悬浮细胞的凋亡情况。可选择性的检测凋亡细胞，而非坏死细胞或因辐照和药物治疗而造成的DNA链断裂的细胞。

使用方法

实验材料（自备）

1. PBS缓冲液（1×，pH7.4）

2. 0.4% Triton X-100（PBS配制）

3. 1%Triton X-100（PBS配制）

4. 石蜡切片处理相关试剂

5. 4%多聚甲醛（PBS配制）

6. 免疫组化笔

7. 3% H2O2（甲醇：ddH2O：H2O2=8:1:1；新鲜配制）

8. 中性树脂

9. ddH2O

实验设计

A. 阳性对照（可选）：

DNase I处理制备阳性对照载玻片。DNase I可以消化单链或双链DNA产生单脱氧核苷酸或单链或双链的寡脱氧核苷酸的核酸内切酶，人为造成细胞凋亡。

B. 阴性对照（可选）：

使用不含TdT Enzyme的Biotin TUNEL Reaction Buffer，用ddH2O替代TdT Enzyme。

C. 实验处理组。

D. 实验对照组。