产品介绍
产品介绍
RIPA裂解液(强,无抑制剂)可用于裂解细胞/组织,有效提取细胞质、细胞膜及细胞核蛋白,获得的蛋白样品可用于常规的蛋白分析,如Western Blot、IP等。本产品的主要成分为100 mM Tris-HCL (pH 8.0)、150 mM NaCl、1% Triton X-100、1% deoxycholic acid、0.1% SDS等。
UElandy提供的另外一款Western及IP细胞裂解液(W6001),其有效裂解成分为1% NP-40。相较于RIPA裂解液(强,无抑制剂),其裂解能力相对较弱,但能够满足一般用户需求。若发现Western及IP细胞裂解液效果不是非常理想,可以尝试使用裂解强度更高的RIPA裂解液(强,无抑制剂)(R6166)。
以贴壁细胞(6孔板)举例,每孔200μLRIPA裂解液,100mL试剂大概可以用于500个孔。
应用范围
细胞裂解、Western-blot、IP
产品货号
R6166S/R6166
储运条件
4℃保存,有效期见外包装;冰袋运输。
产品特点
效果强烈:可以裂解细胞核蛋白,裂解效果强;
适用范围广:适用于WB、IP实验。
产品组分
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组分
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R6166S
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R6166
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RIPA裂解液
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10mL
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100mL
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注意事项
RIPA裂解液(强,无抑制剂)含有较高浓度的去垢剂,因此与Bradford法测定蛋白浓度不兼容,如需测定蛋白浓度可选本公司生产的BCA蛋白定量检测试剂盒(B6167/B6169)。
RIPA裂解液(强,无抑制剂)不含有蛋白酶或其他酶的抑制剂,使用前请根据实验需求加入酶抑制剂,以防蛋白降解。
裂解过程需在冰上进行。
以HeLa细胞为例,1×106cells需要200μL预冷的RIPA裂解液,该裂解液的量相对较充足,在有限细胞的情况下,如需提高蛋白浓度,可适当减少裂解液的量。
裂解产物中如若出现的一小团透明胶状物,属于正常现象,是含有基因组DNA的复合物。
由于温度的变化可能会导致RIPA裂解液页面上漂浮有一层油膜,这层油膜是不影响RIPA裂解液的正常使用。
RIPA裂解液中有SDS成分的存在,4℃保存时可能导致SDS析出,使用前可以37℃水浴加热至完全溶解,之后恢复至室温再继续使用即可。
本产品仅限于科研,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品和药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
自备材料
1. 耗材
离心管
(2)冰
试剂
(1)蛋白酶抑制剂
(2)磷酸酶抑制剂(可选)
(3)1×PBS