Protein A/G 免疫沉淀试剂盒

产品货号: M7404S/M7404M
应用范围: 免疫沉淀
产品规格: 20次反应 100次反应
价 格 :
1144
数  量:
- +
  • 说  明  书: M7404S/M7404M

产品介绍

产品货号:M7404S, M7404M

产品规格:5次反应,100次反应

储存条件:2~8℃保存,有效期见外包装

产品组分

组分 M7404S M7404M
免疫沉淀磁珠UE Protein A/G for IP 300 μL 5 mL
结合缓冲液IP Binding Buffer B 8 mL 150 mL
磷酸盐缓冲液PBS (10×, 用之前请稀释到1×) 5 mL 100 mL
洗涤缓冲液IP Washing Buffer D 5 mL 100 mL
洗脱缓冲液IP Elution Buffer E 500 μL 2.5 mL
中和缓冲液IP Neutralization Buffer F 200 μL 1 mL
磁性分离器Magnetic Separator Stand 2/15 选购

产品介绍

本品是利用生物纳米表面技术使Protein A/G高密度定向包被到超顺磁性微球表面,与当前国际免疫磁珠市场上同类产品相比,该产品具有更多的抗体结合位点,磁珠使用量更少,非特异性结合率低,可便捷高效地进行免疫沉淀实验。每毫升免疫沉淀磁珠结合Human IgG的能力可达到300 μg以上,单个沉淀反应仅需25 μL磁珠即可完成检测。微米级磁珠提供的超大比表面积,大幅缩短抗体与抗原吸附所需的平衡时间,15 min内即可完成抗体吸附过程,30 min内完成抗原沉淀操作。简短的操作时间避免长时间操作造成目标蛋白水解,保证了目标蛋白的活性及蛋白复合物的完整性。免疫沉淀磁珠试剂盒配有经过优化预制的缓冲液,为免疫沉淀实验提供了最佳的反应条件,增强了免疫沉淀实验的稳定性。本产品可广泛应用于细胞裂解物、细胞分泌上清、血清、腹水等样品中抗原的免疫沉淀反应。操作者可以参考本操作说明书附表1的数据了解不同种属来源及亚型的抗体与Protein A/G的结合能力。

FAQ

问:如何提高抗体与磁珠结合效率?
答:磁珠与抗体的结合效率与抗体的种属来源及所属亚型有关,请确认抗体的类型与Protein A/G配基的亲和效率(附表1)。如抗体所属亚型与Protein A/G的亲和度较低,可以通过增加抗体与磁珠的孵育时间(30~120 min)、提高结合缓冲液的 pH值(8~9)及降低离子强度(25~100 mM NaCl)等方法提高亲和效率。

问:如何提高磁珠在免疫沉淀反应中的特异性?
答:可以先将抗体与样品进行孵育,形成抗体-抗原复合物,再用Protein A/G磁珠捕获复合物。这种方法可以提高抗体与抗原的结合效率,并降低磁珠与样品接触的时间,从而提高沉淀产物的特异性。对于蛋白质/核酸共沉淀或染色质免疫共沉淀也推荐使用此法。

问:如何避免磁珠在储存或使用过程中可能出现的聚集情况?
答:磁珠应保存在2~8℃,使用时应避免由于污染而导致的不可逆聚集,或因干燥而导致的聚集。磁珠在低pH的洗脱缓冲液中发生聚集属于正常现象,不影响磁珠的正常使用。在Binding buffer和Elution buffer中添加终浓度为0.1%(v/v)的非离子型去垢剂(如NP-40、Tween-20或Triton X-100)可有效防止磁珠聚集。经过低pH洗脱操作的 磁珠可以用结合缓冲液洗涤至中性,然后用含有0.1%(v/v)Tween-20的Tris buffer(pH7.5)振荡重悬磁珠,并用超声波水浴处理2 min,即可使磁珠恢复均匀状态,以上处理均不影响磁珠的抗体结合效率。

问:如何解决磁珠易粘附管壁的现象?
答:建议使用低吸附率的耗材进行磁珠操作。另外,在缓冲液中添加 0.01%~0.1%(v/v)的非离子型去垢剂 (如NP-40、Tween-20或Triton X-100)可以有效降低磁珠对耗材的粘附)。

问:磁珠在使用过程中出现结块现象?
答:磁珠在使用时如果出现结块现象一般较难振荡打散,容易导致分布不均,出现该问题的原因是磁珠在磁场中放置太久而使磁珠牢固的结合在一起。用超声波水浴处理2 min即可打散磁珠使其重新分散,但应注意超声处理也会使磁珠在样品溶液中捕获的抗体脱落,所以磁珠在加样后洗脱前不宜使用该方法。

已发表文献

M7404S/M7404M

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Protein A/G 免疫沉淀试剂盒