产品介绍

本试剂盒适合从各种琼脂糖凝胶中回收多至20 μg DNA（100 bp-15 kb），回收率为60-85%。琼脂糖凝胶在温和的缓冲液（DE-A溶液）中熔化，其中的保护剂能防止线状DNA在高温下降解，然后在DE-B溶液的作用下使DNA选择性结合到膜上。纯化的DNA纯度高，并保持片断完整性和高生物活性，可直接用于连接、体外转录、PCR扩增、测序、微注射等分子生物学实验。

一 、试剂盒组成、贮存、稳定性

Buffer DE-A：凝胶熔化剂，含DNA保护剂，防止DNA在高温下降解。室温密闭贮存。

Buffer DE-B：结合液（促使大于70 bp的DNA片段选择性结合到DNA吸附柱膜上）。室温密闭贮存。

Buffer W1：洗涤液，室温密闭贮存。

Buffer W2 concentrate：去盐液，使用前，按试剂瓶上指定的体积加入无水乙醇（用100%乙醇或95%乙醇），混合均匀，室温密闭贮存。

Eluent：洗脱液，室温密闭贮存。

二、注意事项

1. Buffer DE-A(含有β-巯基乙醇)、Buffer DE-B 含刺激性化合物，操作时要戴乳胶手套和眼镜，避免沾染皮肤、眼睛和衣服，谨防吸入口鼻。若沾染皮肤、眼睛时，要立即用大量清水或生理盐水冲洗，必要时寻求医疗咨询。

2. 在凝胶回收步骤1中，将凝胶切成细小的碎块可大大缩短凝胶熔化时间(线型 DNA长时间暴露在高温条件下易于水解)，从而提高回收率。勿将含 DNA 的凝胶时间地暴露在紫外灯下，减少紫外线对 DNA造成的损伤。

3. 在凝胶回收步骤2中，凝胶必须完全熔化，否则将严重影响 DNA 回收率。

4. 如果回收率较低，可在胶充分溶解后检测pH值，如果pH大于7.5，可向含有DNA的胶溶液中加3M 醋酸钠调节pH至4-6之间。

5. 将 Eluent 或去离子水加热至 65°C，有利于提高洗脱效率。

6. DNA分子呈酸性，建议在 2.5 mM Tris-HCl，pH 7.0-8.5 洗脱液中保存。

7. 回收率低建议：

1）步骤3之后混合液转移至吸附柱可以放置2-5 min；

2）步骤3之后混合液过柱离心之后将滤液再次重复离心；

3）加热洗脱液温度；

4）洗脱液体积二次重复洗脱。

三、实验准备

1. 第一次使用前，Buffer W2 concentrate中加入指定体积的无水乙醇。

2. 准备无核酸和核酸酶污染的Tip头、离心管。

3. 准备75℃水浴。

4. 使用前，检查Buffer DE-B是否出现沉淀，若出现沉淀，应于70℃温浴加热熔化并冷却至室温后再使用。