总NO检测试剂盒(Total Nitric Oxide Assay Kit)

产品货号: T6027S/T6027L
应用范围: 总 NO 检测
产品规格: 50 T 200 T
价 格 :
499
数  量:
- +
  • 说  明  书: T6027S/T6027L

产品介绍

产品货号:T6027S/T6027L

储运条件

-20℃避光保存,有效期见外包装;冰袋运输。

产品特点

检测精准:精准定量NO含量;

适用范围广:可以检测的样品有细胞裂解液、组织裂解液、细胞或组织的培养液、血清、血浆或尿液等中的一氧化氮含量。

产品组分

组分 T6027S (50 T) T6027L (200 T)
A. 样品稀释液 4 mL 16 mL
B. NADPH 0.5 mg 2 mg
C. FAD 0.5 mL 2×1 mL
D. Nitrate Reductase 250 μL 1 mL
E. LDH Buffer 0.5 mL 2×1 mL
F. LDH 0.5 mL 2×1 mL
G. 1 M NaNO2 250 μL 1 mL
H. Griess Reagent I 2×1.25 mL 10 mL
I. Griess Reagent II 2×1.25 mL 10 mL

注意事项

1. 如果Griess Reagent I取出时含有沉淀,可将其置于37℃水浴锅中,水浴直至沉淀溶解。

2. 对于含有较高浓度硝酸盐的培养液,在检测一氧化氮前必须先换成其他适当培养液例如:DMEM、MEM、F12等,或换成HBSS或PBS等。因为较高浓度的硝酸盐会对本试剂盒产生干扰。

3. 由于检测过程中有还原反应,凡是影响还原反应的氧化或还原试剂要注意避免,例如常用还原剂DTT和巯基乙醇。

4. 反应必须避光进行,每次加入试剂时,需避免各检测孔中产生气泡,以免气泡干扰检测结果。

5. 样品的用量上限为60 μL,血清、血浆或组织匀浆液通常使用40 μL就足够了。样品不足60 μL时,不同样品之间的体积需要保持一致,体积不足的部分用制备或稀释样品时所使用的溶液补足。

6. 可以同时设置加入200 μL水或PBS的2~3个孔为阴性对照,这2~3个孔仅仅加入水或PBS,不再加入任何其他试剂。

7. 检测时,如无540 nm滤光片,520~560 nm的滤光片也可以使用。

8. NADPH,Nitrate Reductase,NaNO2,Griess Reagent I和Griess Reagent II需避光保存。

9. NADPH配制成溶液后须少量分装,并放于-70℃保存。

10. 本产品仅限于科研,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。

11. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

自备材料

1. 耗材

96孔细胞培养板

2. 试剂

PBS

3. 仪器

多功能酶标仪

FAQ

问:检测结果标准曲线良好,但样品吸光度很低,与空白孔相接近是什么原因?该怎么解决?

答:标准曲线良好说明检测试剂盒基本没有问题,样品吸光度低说明书样品中NO含量很低。 可以采取的解决方案如下: (1)加大样本和标准品的使用量至60 μL,其余用量不变。 (2)浓缩样本,在收集样本的时候尽量使NO的浓度保持较高(例如裂解细胞时采用较小体积的裂解液)。另外还可以考虑真空干燥或者真空冷冻干燥的方式浓缩样品。

问:检测时发现每个样品的吸光度都非常高是什么原因造成的?

答:在使用RPMI 1640培养液时会发生这种情况,因为该培养液中含有较高浓度的硝酸盐从而会使样品检测出来的吸光度都非常高,其他含有较高浓度硝酸盐的试剂也会产生类似的情况。

已发表文献

T6027S/T6027L

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总NO检测试剂盒(Total Nitric Oxide Assay Kit)