产品概述:
储存条件
Buffer VL: 细胞和病毒裂解液,室温密闭贮存。
Buffer G-B: 蛋白沉淀液,室温密闭贮存。
Buffer DV-A: Buffer DV 的制备液(请参照实验准备Buffer DV配制),室温密闭贮存。
Buffer DV: 相分离液,室温密闭贮存。
Buffer BV: DNA结合液,室温密闭贮存。
Buffer W1: 洗涤液,室温密闭贮存。
Buffer W2 concentrate: 去盐液。使用前,按试剂瓶上指定的体积加入无水乙醇(可用100%乙醇或95%乙醇),混合均匀,室温密闭贮存。
Eluent: 2.5 mM Tris-HCI, pH 8.5, 室温密闭贮存。
流程图
说明书:
常见问题解答:
◆得率低或者得不到DNA
血液中白细胞的含量低
样品与VL没有充分的混匀
下相液体被上相液体污染减少了DNA与制备膜的结合
DNA过早的从膜上脱落。Buffer W2中没有加无水乙醇或者用低浓度的乙醇代替了无水乙醇。
DNA没有有效的被洗脱。可先将洗脱液于65℃预热。
◆低 A260/280
样品与VL没有充分的混匀
样品与DV没有充分的混匀
样品中白细胞的数量过多
血的用量过多
◆基因组降解
根据降解的完整性,在琼脂糖凝胶电泳中基因组DNA要么呈现一条糊状条带要么是大分子量条带前的一个拖尾现象。在这个纯化过程中任何的物理作用都不会有效的造成视觉上可见的降解,引起这种情况的大多数可能来源于酶。酶引起的降解可能是血样品长时间或者不当的储存导致的。
◆酶反应效果差
盐分污染
乙醇污染
◆过滤器阻塞
样品中白细胞含量升高
将过多的相间残留物质移入过滤器中