Double Helix™ Cell Freezing Medium 海利克思™通用细胞冻存液

产品说明书

Double Helix™ Cell Freezing Medium 海利克思™通用细胞冻存液中不含血清成分 ，配方化学成分明    确 ，不含动物来源蛋白。通过含有DMSO 的复合型冻存保护剂 ，在细胞冻存过程中避免细胞内部形成冰 晶 ，提高细胞复苏活率 ，适合长期低温保存细胞。

质量属性

产品用途

在处理冻存液时使用无菌技术。本产品仅用于科学研究。

安全信息

阅读物料安全数据表（MSDS）并依据相关的安全操作规范 ，佩戴护目镜 ，洁净服 ，口罩和手套等。

细胞冻存步骤

1.准备所需冻存的细胞 ，且细胞状态较好；

2.使用自动细胞计数仪或其它计数仪器进行细胞计数 ，根据最终冻存密度计算出细胞冻存液所需的体 积；

3.通过 1000rpm  离心 5 分钟收获细胞 ，弃去上清 ，用细胞冻存液重悬；

4.根据规格立即将细胞悬液分装到冻存管中；

5. 在自动控制速率冷冻设备中实现程序性降温后 ，将冻存细胞转移到液氮或-80℃以下保存；若无法实 现程序性降温 ，可以在-80℃冰箱冷冻保存 24 小时后 ，将冻存细胞转移到液氮或-80℃以下保存。

细胞复苏步骤

1. 将冻存细胞从液氮罐或者-80℃冰箱中取出 ，迅速在37℃水浴中快速解冻 ，过程约1~2 分钟；

2. 将细胞悬液转移至 5mL 预热的细胞培养基 ，吹打均匀；1000rpm 离心 5 分钟 ，丢弃上清液；使用 5mL 细胞培养基重悬；

3.使用自动细胞计数仪或其它计数仪器进行细胞计数 ，根据需要的细胞密度吸取细胞悬液至125mL 摇 瓶 ，加入适量的细胞培养基 ，使复苏细胞密度为 (3～5)×105cells/mL；

4.在 5～8% CO2 ，37℃的培养箱或摇床进行培养；

5. 细胞复苏后培养 2～5 天处于对数生长中期时传代。在进行其它实验之前 ，复苏的细胞至少应进行三 次传代。

建议冻存密度

注意事项

1.选择冻存处于对数生长期 ，且活率＞95%的细胞 ，有助于提高复苏细胞存活率；

2.不同细胞类型冻存效果可能存在差异 ，建议在使用本产品大规模冻存细胞前 ，先进行实验性冻存及复 苏测试 ，确认性能后再进行正式冻存。例 ：常规细胞株 ，冻存前细胞活率＞95% ，进行实验性冻存及 复苏测试 ，复苏后细胞活率＞90%为佳。

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