产品概述：
产品参数
外观：白色/黄色/淡黄色固体
Ex/Em（结合DNA）= 352/461 nm
Ex/Em（未结合DNA）= 346/460 nm
CAS号：23491-45-4
分子式：C25H24N6O • 3HCl
分子量：533.9
分子结构图：
储存条件
-20℃避光保存，有效期见外包装。
产品介绍
Hoechst 33258，也称bis Benzimide H 33258或HOE 33258，是一种非嵌入性的亮蓝色荧光染料。染料在溶液中荧光较弱，它们在活细胞中DNA聚AT序列富集区域的小沟处与DNA结合后荧光变得明亮，故此类染料也被称为DNA探针。因背景较低，故染色细胞不需洗涤步骤，且染色非常稳定，对活细胞无毒，结合DNA染色后可持续几天或更长时间。Hoechst 33258与Hoechst 33342相比在水中的溶解度要高，但两种染料均具有高细胞膜渗透性，被广泛用于细胞凋亡检测，染色后可用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。
以贴壁细胞（96孔板）举例，每孔100 μL染色工作液，染色工作液浓度5 µg/mL计算，10 mg配置为工作液大概可以用于20000个孔的染色。
注意事项
1. 使用前请将产品瞬时离心至管底，再进行后续实验。
2. Hoechst染料通常用于染色哺乳动物细胞，但是也可以用来染色死活细菌，染色死活细菌时推荐在PBS或150 mM的NaCl中溶解为终浓度12-15 μg/mL的染色液室温染色30 min。对酵母的染色较弱。通常对于死细胞的染色要比活细胞染色亮度高。
3. Hoechst 33258染料溶于水时溶解度可达10 mg/mL，用于细胞核染色时，推荐的Hoechst 33258工作浓度为0.5-10 μg/mL，客户可根据实际染色情况对染色液浓度及染色时间上下摸索。
4. 荧光染料都存在淬灭的问题，建议活细胞或组织染色后立即观察。
5. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
常见问题解答：
◆Hoechst 33258和Hoechst 33342有什么区别吗？
对于活细胞的染色，Hoechst 33342的膜通透性更好一些，对于固定样品的染色，二者染色效果没有差异。
◆固定液如何配制？
可以用4%的多聚甲醛进行固定。
使用本产品的文献：
参考文献
1.Hoechst 33258 staining for detecting mycoplasma contamination in cell cultures: a method for reducing fluorescence photobleaching
应用方向：检测细胞培养中支原体污染
2.A rapid method for accurate DNA measurements in single cells in situ using a simple microfluorimeter and Hoechst 33258 as a quantitative fluorochrome
应用方向：对单个细胞精确的DNA定量
3.Fluorometric assay of DNA in cartilage explants using Hoechst 33258
应用方向：DNA含量测定
4.Use of Merocyanine 540 and Hoechst 33258 for the selective killing of contaminating mycoplasmas in cell cultures
应用方向：与Merocyanine 540联用，选择性杀灭支原体
5.Combined use of fluorescent peanut agglutinin lectin and Hoechst 33258 to monitor the acrosomal status and vitality of human spermatozoa
应用方向：监测人精子顶体状态和活力
6.2′‐Deoxyadenosine Induces Apoptosis in Rat Chromaffin Cells
应用方向：观察细胞的形态学特征
7.A novel, sensitive fluorometric staining techniqUE for the detection of DNA in RNA preparations
应用方向：琼脂糖凝胶电泳中DNA的检测
8.Automated determination of DNA using the fluorochrome Hoechst 33258
应用方向：DNA浓度
9.A simple DNA-dependent fluorescence enhancement assay for cell number
应用方向：细胞计数
10.Chromosome sorting and DNA seqUEnce localization
应用方向：染色体分选
11.Fluorometric Properties of the Bibenzimidazole Derivative Hoechst 33258, a Fluorescent Probe Specific for AT Concentration in Chromosomal DNA
应用方向：染色体Q带的识别
12.12/15-lipoxygenase translocation enhances site-specific actin polymerization in macrophages phagocytosing apoptotic cells
应用方向：细胞核染色
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