产品概述:
产品参数
外观:可溶于水的浅黄色固体
Ex/Em:328/533 nm
CAS号:103404-75-7
分子式:C11H7N2NaO3S2
分子量:302.3
储存条件
-20℃干燥避光保存,有效期见外包装。
产品介绍
活体成像技术(optical in vivo imaging)目前主要采用生物发光(bioluminescence)与荧光(fluorescence)两种技术,生物发光法是基于萤光素酶能催化底物化学发光的原理,将体外能稳定表达萤光素酶的细胞株植入动物体内,与后期注射入体内的底物发生反应,利用光学系统检测光强度,间接反映出细胞数量的变化或细胞的定位。这项技术已被广泛应用于多个领域,最常用的有肿瘤或疾病动物模型的建立,并可用于病毒学研究、siRNA研究、干细胞研究、蛋白质相互作用研究等。
D-Luciferin是萤光素酶(Luciferase)的常用底物,普遍用于整个生物技术领域,特别是体内活体成像技术。在ATP和萤光素酶的作用下,萤光素能够被氧化,并且在560 nm检测到其化学发光。Luciferin由luc基因编码,该基因作为报告基因在多种细胞中存在。由于化学发光的低背景性,luc基因在很低的表达水平下就可以被监测到。此外,萤光素/萤光素酶被用来测量10-15摩尔量的ATP。
注意事项
1. D-Luciferin , Sodium Salt样品的背景荧光主要来源于萤光素,如果不立即使用本产品,建议分装后,-20℃避光保存。
常见问题解答:
◆底物的激发波长和发射长?
化学发光,无需激发波长。萤火虫萤光素发射波长是 560 nm。
◆推荐仪器?多功能酶标仪能用吗?
1、推荐仪器:具有生物化学发光检测模块。萤光素产生的光可以被光度计或闪烁计数器检测。常见的活体成像仪器:如 IVIS® Lumina 小动物活体成像系统,德国 Bruker公司的 In-Vivo Xtreme 多模式小动物活体成像仪。
2、多功能酶标仪:需要和仪器厂家确认是否具体生物化学发光检测模块。注:不能用荧光显微镜。
◆底物可以进入活细胞中或者血脑屏障吗?
D-萤光素约280道尔顿,萤光素的水溶性和脂溶性都非常好,可以通过血脑屏障,胎盘屏障和血液测试屏障,也可以进入活细胞。
◆活体成像实验,无效果的原因?
成功进行活体成像实验需要以下条件:
1)目的组织或细胞表达萤光素酶基因;
2)萤光素底物注射成功;
3)依赖于发光部位的组织厚度。实验不成功,可从上述因素查找,萤光素酶基因是否表达,萤光素底物是否未正确注射,及发光部位较深等
◆产品不小心放在室温下或暴露在光线下了,还可以用吗?
产品在室温下可以稳定保存很多天,因此产品很可能仍然可以正常工作。 为安全起见,我们建议在处理大量样品或珍贵样品之前,先进行小规模阳性对照实验,以确认该产品仍然适用于您的应用。
◆两者的区别是什么?
萤光素钾盐和萤光素钠盐应用上没有差别,两者的差别在于物理性状上如外形和溶解性。钠盐的水溶性高于钾盐。从目前发表的文献来看,钾盐的使用率远高于钠盐,尤其是体内实验,两者功效相同。
◆活体成像有必要建立萤光素酶动力学曲线吗?
注射方式,动物类型以及体重等都会影响信号的发射,因此建议每次实验都要做萤光素酶动力学曲线,确定最佳信号平台期和最佳的检测时间。
使用本产品的文献:
1.Creating Red Light-Switchable Protein Dimerization Systems as Genetically Encoded Actuators with High Specificity
Zhimin Huang, Zengpeng Li, Xiao Zhang, Shoukai Kang, Runze Dong, Li Sun, Xiaonan Fu, David Vaisar, Kurumi Watanabe,Liangcai Gu
ACS Synth. Biol
2.Antigen Capture and Immune Modulation by Bacterial Outer Membrane Vesicles as In Situ Vaccine for Cancer Immunotherapy Post-Photothermal Therapy
Yao Li, Kaiyue Zhang, Yao Wu, Yale Yue, Keman Cheng, Qingqing Feng, Xiaotu Ma, Jie Liang, Nana Ma, Guangna Liu, Guangjun Nie , Lei Ren, Xiao Zhao
Small
参考文献:
1.Application of the firefly luciferase reporter gene
应用方向:体外化学发光分析
2.Optical imaging of Renilla luciferase reporter gene expression in living mice
应用方向:活体成像
3.Real-time measurements of acetylcholine-induced release of ATP from bovine medullary chromaffin cells
应用方向:高灵敏度 ATP 分析