产品概述:
产品参数
外观:可溶于水的浅黄色固体
Ex/Em:328/533 nm
CAS号:115144-35-9
分子式:C11H7N2O3S2K
分子量:318.4
分子结构图:
储存条件
-20℃ 干燥避光保存,有效期见外包装。
产品介绍
D-Luciferin是萤光素酶(Luciferase)的常用底物,普遍用于整个生物技术领域,特别是体内活体成像技术。在ATP和萤光素酶的作用下,萤光素能够被氧化,并且在560 nm检测到其化学发光。Luciferin由luc基因编码,该基因作为报告基因在多种细胞中存在。由于化学发光的低背景性,luc基因在很低的表达水平下就可以被监测到。此外,萤光素/萤光素酶被用来测量10-15摩尔量的ATP。
注意事项
1. D-Luciferin, Potassium Salt样品的背景荧光主要来源于萤光素,如果不立即使用本产品,建议分装后,-20℃避光保存。
常见问题解答:
◆底物的激发波长和发射长?
化学发光,无需激发波长。萤火虫萤光素发射波长是 560 nm。
◆推荐仪器?多功能酶标仪能用吗?
1、推荐仪器:具有生物化学发光检测模块。萤光素产生的光可以被光度计或闪烁计数器检测。常见的活体成像仪器:如 IVIS® Lumina 小动物活体成像系统,德国 Bruker公司的 In-Vivo Xtreme 多模式小动物活体成像仪。
2、多功能酶标仪:需要和仪器厂家确认是否具体生物化学发光检测模块。注:不能用荧光显微镜。
◆底物可以进入活细胞中或者血脑屏障吗?
D-萤光素约280道尔顿,萤光素的水溶性和脂溶性都非常好,可以通过血脑屏障,胎盘屏障和血液测试屏障,也可以进入活细胞。
◆活体成像实验,无效果的原因?
成功进行活体成像实验需要以下条件:
1)目的组织或细胞表达萤光素酶基因;
2)萤光素底物注射成功;
3)依赖于发光部位的组织厚度。实验不成功,可从上述因素查找,萤光素酶基因是否表达,萤光素底物是否未正确注射,及发光部位较深等
◆产品不小心放在室温下或暴露在光线下了,还可以用吗?
产品在室温下可以稳定保存很多天,因此产品很可能仍然可以正常工作。 为安全起见,我们建议在处理大量样品或珍贵样品之前,先进行小规模阳性对照实验,以确认该产品仍然适用于您的应用。
◆两者的区别是什么?
萤光素钾盐和萤光素钠盐应用上没有差别,两者的差别在于物理性状上如外形和溶解性。钠盐的水溶性高于钾盐。从目前发表的文献来看,钾盐的使用率远高于钠盐,尤其是体内实验,两者功效相同。
◆活体成像有必要建立萤光素酶动力学曲线吗?
注射方式,动物类型以及体重等都会影响信号的发射,因此建议每次实验都要做萤光素酶动力学曲线,确定最佳信号平台期和最佳的检测时间。
使用本产品的文献:
参考文献
1.1,25-Dihydroxyvitamin D Down-regulates Cell Membrane Growth- and Nuclear Growth-promoting Signals by the Epidermal Growth Factor Receptor
应用方向:荧光素酶活性检测:启动子研究
2.Optical imaging of Renilla luciferase reporter gene expression in living mice
应用方向:活体成像
3.Real-time measurements of acetylcholine-induced release of ATP from bovine medullary chromaffin cells
应用方向:高灵敏度 ATP 分析