产品概述:
产品信息
组分
Q2038S(100T)
Q2038L(500T)
浓度
储存
A. Qbtest® X-Green II
250 µL
1.25 mL
2-6℃ 干燥避光
B. Qbtest® 1× Buffer
50 mL
250 mL
1× Buffer
2-6℃
C. Qbtest® dsDNA标准液1
1 mL
5 mL
0 ng/μL
2-6℃
D. Qbtest® dsDNA标准液2
1 mL
5 mL
10 ng/μL
2-6℃
储存条件
4℃避光保存,有效期见外包装。长期保存可以储存在-20ºC。
产品参数
Ex/Em: 480/520 nm(结合dsDNA)
产品介绍
Qbtest® X-Green II 双链DNA定量试剂盒是荧光检测dsDNA并进行定量的一种产品,这种检测方法非常灵敏。常用于分子生物学中cDNA文库的构建、亚克隆DNA片段的纯化及应用,如进行DNA定量、产物扩增和引物的进一步检测。常规的DNA含量检测方法是在260 nm处测其吸光值。这种方法的主要缺点是核苷酸、单链核酸和蛋白质对信号的影响很大,并且还会受到核酸制备过程中污染物的干扰,无法区分DNA和RNA,而且灵敏度低(5 μg/mL dsDNA溶液A260 = 0.1)。Qbtest® X-Green II 双链DNA定量试剂盒检测方法简单方便,已成为生物制品残留DNA检测的标准。
Qbtest® X-Green II 只有与dsDNA结合后才发出荧光,并且荧光强度与DNA浓度成正比。Qbtest® X-Green II双链DNA定量试剂盒升级款检测浓度范围10 pg/μL - 100 ng/μL、检测质量范围0.2 – 100 ng,且线性关系较好(R2>0.99)。
该试剂盒可用于Qubit仪器,效能等同于Qbtest® dsDNA HS Assay Kits。
注意事项
1. 使用前请将产品瞬时离心至管底,再进行后续实验。
2. 荧光染料均存在淬灭问题,请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。
3. 1× Qbtest® X-Green II 工作液最好现配现用,以保证最佳结果。
4. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
常见问题解答:
◆该试剂盒能否指示核酸样品中的样品质量?
不可以。该试剂盒只能定量样品中dsDNA的含量。Qbtest荧光计无法通过吸光度读数来提供A260/A280比率或检测核酸样品中的蛋白质。这可以通过NanoDrop仪器完成。 如果您的样品含有可能影响检测的蛋白质或其他污染物,则应进一步纯化。
◆与酶标仪相比,使用Qbtest荧光计的Qbtest定量分析的准确性和灵敏度如何?
Qbtest定量分析的准确度和灵敏度与酶标仪相同。这是产品开发过程中的要求。
◆使用Qbtest荧光计时读数随着时间降低。这是为什么?
(1)确保孵育2分钟后再读取读数(对于蛋白,孵育时间为15分钟)。
(2)如果你将试管留在Qubit 荧光计内并多次读数,那么读数将随着试管在仪器内的升温而降低。如果你需要读取多个读数,请将试管从仪器中取出,放置于试管架上,让它与室温平衡至少30秒,然后再重新读取读数。
(3)如果样本是避光保存的,那么你可以在混匀后3小时内读取读数。超过这一时间,读数将不准确。
(4)在读取间隔,将标准品和样本试管保存于黑暗避光处。
◆DNA长度对dsDNA检测结果有影响吗?
大致在20-mer或更短范围内的链信号水平较低。对于大部分由短链组成的dsDNA样本,仍可使用试剂,但应使用与样本长度相当的dsDNA标准品。
使用本产品的文献:
引用文献
1.Evaluation of PCR amplification bias by terminal restriction fragment length polymorphism analysis of small-subunit rRNA and mcrA genes by using defined template mixtures of methanogenic pure cultures and soil DNA extracts
应用方向:dsDNA定量
2.Automated template quantification for DNA seqUEncing facilities
应用方向:质粒DNA定量