产品概述：
产品内容
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组分 |
规格 |
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A. DCFH-DA（10 mM） |
0.1 mL |
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B. 活性氧阳性对照（Rosup 100 mM） |
1 mL |
产品参数
Ex/Em：504/529 nm
储存条件
-20℃避光保存，有效期见外包装。
产品介绍
DCFH-DA（二氯二氢荧光素-乙酰乙酸酯）本身无荧光，可自由透过活细胞膜进入细胞内，并被细胞内的酯酶水解，形成 DCFH，DCFH 无荧光且不能通透细胞膜，从而被细胞内的活性氧氧化生成有荧光的 DCF。根据活细胞中荧光的产生，可以判断细胞活性氧的含量和变化。用流式细胞仪或荧光显微镜可直接观察，是一种经典的组织或活细胞中活性氧检测方法。Rosup 为活性氧阳性诱导药物，根据其荧光信号强度，可分析活性氧的真正水平。
注意事项
1. 阳性对照 Rosup 一般使用浓度为 100 μM（推荐浓度 100-400 μM，具体依细胞类型而定）。通常刺激后 30 min-4 h 可以观察到显著的活性氧水平升高。对于不同的细胞，活性氧阳性对照的效果可能有较大的差别。如果在刺激后 30 min 内观察不到活性氧的升高，可延长诱导时间或适当提高活性氧阳性对照的浓度。如果活性氧升高得过快，可缩短诱导时间或适当降低活性氧阳性对照的浓度。
2. 实验过程中，如果发现没有刺激的阴性对照细胞荧光也比较强，可以按照 1:2000-1:5000 稀释 DCFH-DA，使 DCFH-DA 的终浓度为 2-5 μM。探针装载的时间也可以根据情况在 15-60 min 内适当进行调整。
3. 活性氧阳性对照（Rosup）仅仅用于作为阳性对照的样品，并不是在每个样品中都需加入活性氧阳性对照。
4. 探针装载后，一定要洗净残余的未进入细胞内的探针，否则会导致背景较高。
使用本产品的文献：
1.Identification of a new natural biflavonoids against breast cancer cells induced ferroptosis via the mitochondrial pathway
Yang Xie，Xi Zhou，Jing Li，Xiao-Chang Yao，Wan-Li Liu，Feng-Hua Kang，Zhen-Xing Zou，Kang-Ping Xu，Ping-Sheng Xu，Gui-Shan Tan
Bioorganic Chemistry Volume 109, April 2021, 104744
2. Transcriptional characteristics and functional validation of three monocyte subsets during aging.
Chen Wang, Yating Cheng , Boyu Li , Xueping Qiu , Hui Hu , Xiaokang Zhang , Zhibing Lu and Fang Zheng
Wang et al. Immunity & Ageing (2023) 20:50
3. The immunomodulatory efects of metformin in LPS‑induced macrophages: an in vitro study.
Zhiyong Wang , Min Wang , Mao Lin , Pei Wei
Infammation Research
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