产品概述:
货号 |
名称 |
Abs/Em (nm) |
规格 |
YP0059S |
YF®488-Phalloidin YF®488标记鬼笔环肽(绿色) |
490/515 |
50 T |
YP0059L |
300 T |
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YP0060S |
YF®555-Phalloidin YF®555标记鬼笔环肽(橙红) |
555/565 |
50 T |
YP0060L |
300 T |
||
YP0052S |
YF®594-Phalloidin YF®594标记鬼笔环肽(红色) |
590/617 |
50 T |
YP0052L |
300 T |
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YP0053S |
YF®633-Phalloidin YF®633标记鬼笔环肽(远红) |
630/650 |
50 T |
YP0053L |
300 T |
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YP0123S |
YF®640-Phalloidin YF®640标记鬼笔环肽(远红) |
642/662 |
50 T |
YP0123L |
642/662 |
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YP0055S |
YF®680-Phalloidin YF®680标记鬼笔环肽(近红) |
681/698 |
50 T |
YP0055L |
300 T |
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YP0063S |
Rhodamine-Phalloidin 罗丹明标记鬼笔环肽(橙红) |
546/575 |
50 T |
YP0063L |
300 T |
储存条件:-20℃干燥、避光保存,有效期见外包装。若配制成水溶液,应小量分装保存。
应用范围:细胞骨架染色
产品介绍
鬼笔环肽是从致命的伞形毒蕈蘑菇中分离出来的一种毒素,可特异性结合于F-肌动蛋白的双环肽。因此用荧光染料标记的鬼笔环肽可以非常方便地研究F-肌动蛋白的分布。鬼笔环肽内部,在半胱氨酸和色氨酸之间含有不常见的硫醚桥形成内环结构。在pH升高时,该硫醚被裂解,鬼笔环肽失去对肌动蛋白的亲和力。
YF®染料是我司开发的一系列新一代荧光染料,与其他荧光染料相比,在亮度,光稳定性和水溶性方面具有综合优势。YF®荧光染料标记的鬼笔环肽可在纳摩尔水平染色F-肌动蛋白。在各种植物细胞或动物细胞中,标记的鬼笔环肽对大、小细丝具有相似的亲和力,平均每个肌动蛋白亚基结合一个鬼笔环肽分子。不同于抗体,鬼笔环肽与肌动蛋白的结合亲和力在不同物种间没有显著变化。非特异性染色可以忽略不计,染色和未染色区域之间的对比度非常大。鬼笔环肽将单体/聚合物的平衡转向聚合状态,将聚合临界浓度降低至30倍。鬼笔毒肽类 (Phallotoxins) 可通过抑制细胞松弛素的解聚,碘化钾和升高的温度,稳定F-肌动蛋白。因为鬼笔环肽缀合物很小,大约直径12-15 Å,分子量< 2000 Daltons,多种肌动蛋白结合蛋白,包括肌球蛋白,原肌球蛋白和后肌钙蛋白依然可以和鬼笔环肽标记的肌动蛋白结合。更重要的是,鬼笔环肽标记的肌动蛋白丝保持功能,标记甘油肌纤维仍然收缩,标记的肌动蛋白丝仍然可以继续移动。而且荧光标记的鬼笔环肽也可用于对细胞中F-肌动蛋白进行定量研究。
注意事项
1. 使用前请将产品瞬时离心至管底,再进行后续实验。
2. 本产品为冻干粉形式,微量不易观察,使用前请瞬时离心,加适当溶剂溶解后使用,溶解后的溶液近乎透明色。
3. 若出现染色效果不佳时,可以采用含1%BSA的PBS预孵育20-30min,可改善染色效果。
常见问题解答:
◆为什么我拿到的是空管?
本产品为冻干粉形式,微量不易观察,使用前请瞬时离心,加适当溶剂溶解后使用。
◆鬼笔环肽染色细胞骨架过程中,能使用甲醇固定细胞吗?
甲醇会破坏Actin蛋白,因此不能使用含有甲醇的固定液,并且使用不含甲醇的甲醛。
◆为什么用鬼笔环肽结合F-actin标记石蜡切片,没有看到信号?
当细胞和组织经由二甲苯或丙酮之类的溶剂处理时(例如组织切片脱石蜡期间),它通过阻止鬼笔环肽结合的方式来影响F-actin。可以使用通常不用有机溶剂洗涤的冷冻切片代替石蜡切片,或者可以使用抗肌动蛋白抗体。
◆鬼笔环肽染料能重复利用吗?
正常情况下染色液在使用后,可能会影响染色效果,最好不要重复使用;我们的鬼笔环肽按说明书添加,浓度较低,这是染料不能重复利用的原因。
◆鬼笔环肽染色F-Actin, 有的染上,有的没染上,并且染色信号较弱怎么办?
(1)可能是染料浓度低或孵育时间不足,建议增加染料浓度或培养时间。
(2)可能是在错误的波长下分析细胞,建议重新检查过滤器设置是否正确。
◆不进行透化步骤,鬼笔环肽直接染色固定后的细胞可以吗?
荧光标记的phalloidins,只能用于在固定透化后的组织切片、细胞培养和无细胞实验中染色F-actin。
◆染色后,没有荧光信号怎么办?
(1)检查储液、工作液配制是否有误。
(2)固定及透化步骤尤为重要,使用新鲜配置的4%多聚甲醛进行固定,使用新鲜配置的0.5% Triton X-100 进行透化。摸索最佳的固定及透化时间。
(3)摸索最佳染色工作液浓度及染色时间。
◆可以用于做流式细胞吗?
该产品主要是用于微丝的染色,一般用荧光显微镜观察结果,不推荐用流式检测。
◆可以用普通荧光显微镜观察吗?
普通的荧光显微镜也是可以检测的,激光共聚焦拍照效果会更好一些。
◆探针的浓度是多少?
请按照说明书的稀释比例进行使用,具体浓度信息未知。
使用本产品的文献:
1.Acanthopanax senticosus aqUEous extract ameliorates ovariectomy-induced bone loss in middle-aged mice by inhibiting the receptor activator of nuclear factor-κB ligand-induced osteoclastogenesis
Huanhuan Xu,Jing Xu,Fei Chen,Titi Liu,Jin Li,Li Jiang,Yuankan Jia,Caijiang Hu,Ziqi Gao,Chunxia Gan,Lihong Hu,Xuanjun Wang,Jun Sheng
Food & Function
2.WS2 Nanosheets at Noncytotoxic Concentrations Enhance the Cytotoxicity of Organic Pollutants by Disturbing the Plasma Membrane and Efflux Pumps
- Peng Yuan ,
- Qixing Zhou, and
- Xiangang Hu
Environmental Science & Technology
3.Real-Time Quantification of Nanoplastics-Induced Oxidative Stress in Stretching Alveolar Cells
Ecotoxicology and Environmental Safety
Hui-Qian Wu, Yu-Ting Qi, Bing-Yi Guo, Yi Zhao, Xin-Wei Zhang and Wei-Hua Huang
5.Nanosensor detection of reactive oxygen and nitrogen species leakage in frustrated phagocytosis of nanofibres
1.4D Super-Resolution Microscopy with Conventional Fluorophores and Single Wavelength Excitation in Optically Thick Cells and TissUEs
应用方向:人体组织切片,心脏大鼠心肌细胞和密集生长的神经元培养物
2.Fluorescent phallotoxins as probes for filamentous actin
应用方向:组织切片、动物细胞、植物细胞
3.A balance of Btk and SHIP activation regulates B-cell receptor cluster formation by controlling actin remodeling
应用方向:哺乳动物细胞:小鼠脾B细胞
4.Fluorescent phallotoxins as probes for filamentous actin
应用方向:组织切片
5.Formation of actin clusters in rat liver parenchymal cells on phalloidin poisoning as visualized by a fluorescent phallotoxin
应用方向:组织切片
6.F-actin architecture in coleoptile epidermal cells
应用方向:植物细胞
7.A Rac switch regulates random versus directionally persistent cell migration
应用方向:哺乳动物细胞: 原代人类成纤维细胞
8.A role for actin, Cdc1p, and Myo2p in the inheritance of late Golgi elements in Saccharomyces cerevisiae.
应用方向:酿酒酵母菌细胞