产品概述:
产品介绍
RIPA裂解液(强,无抑制剂)可用于裂解细胞/组织,有效提取细胞质、细胞膜及细胞核蛋白,获得的蛋白样品可用于常规的蛋白分析,如Western Blot、IP等。本产品的主要成分为100 mM Tris-HCL(pH 8.0)、150 mM NaCl、1% Triton X-100、1% deoxycholic acid、0.1% SDS等。
UElandy提供的另外一款Western及IP细胞裂解液(W6001),其有效裂解成分为1% NP-40。相较于RIPA裂解液(强,无抑制剂),其裂解能力相对较弱,但能够满足一般用户需求。遇到某些难溶解蛋白的Western,若发现Western及IP细胞裂解液效果不是非常理想,可以尝试使用裂解强度更高的RIPA裂解液(强,无抑制剂)(R6166)。
以贴壁细胞(6孔板)举例,每孔200 μL RIPA裂解液,100 mL试剂大概可以用于500个孔。
注意事项
1. RIPA裂解液(强,无抑制剂)含有较高浓度的去垢剂,因此与Bradford法测定蛋白浓度不兼容,如需测定蛋白浓度可选本公司生产的BCA蛋白定量检测试剂盒(B6167)。
2. RIPA裂解液(强,无抑制剂)不含有蛋白酶或其他酶的抑制剂,使用前请根据实验需求加入酶抑制剂,以防蛋白降解。
3. 裂解过程需在冰上进行。
4. 以Hela细胞为例,1 × 106 cells需要200 μL预冷的RIPA裂解液,该裂解液的量相对较充足,在有限细胞的情况下,如需提高蛋白浓度,可适当减少裂解液的量。
5. 裂解产物中如若出现的一小团透明胶状物,属于正常现象,是含有基因组DNA的复合物。