产品概述:
本试剂盒适合从各种琼脂糖凝胶中回收多至8 μg DNA(70 bp-10 kb),回收率为60-85%。通过对 BufferDE-A 进行配方改良,消除了原本刺激性难闻的臭味,便于实验者安全地进行操作使用。琼脂糖凝胶在温和的缓冲液(DE-A溶液)中熔化,其中的保护剂能防止线状DNA在高温下降解,然后在DE-B溶液的作用下使DNA选择性结合到膜上。纯化的DNA纯度高,并保持片断完整性和高生物活性,可直接用于连接、体外转录、PCR扩增、测序、微注射等分子生物学实验。
一、试剂盒组成、贮存、稳定性
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Cat.No. |
UE-GX-PLUS -10 |
UE-GX-PLUS -50 |
UE-GX-PLUS -250 |
UE-GX-PLUS -500 |
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Kit size |
10 preps |
50 preps |
250 preps |
500 preps |
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Miniprep column C15 |
10 |
50 |
250 |
500 |
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2 ml Microfugetube |
10 |
50 |
250 |
500 |
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1.5 ml Microfuge tube |
10 |
50 |
250 |
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Buffer A |
6 ml |
28 ml |
145 ml |
280 ml |
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Buffer DE-A |
14 ml |
2×33 ml |
2×165 ml |
2×330 ml |
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Buffer DE-B |
7 ml |
33 ml |
165 ml |
330 ml |
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Buffer W2 concentrate |
5 ml |
24 ml |
2×72 ml |
2×120 ml |
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Eluent |
1 ml |
5 ml |
25 ml |
50 ml |
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Protocol manual |
1 |
1 |
1 |
1 |
Buffer A:制备管活化处理液,室温密闭贮存。
Buffer DE-A:凝胶熔化剂,含DNA保护剂,防止DNA在高温下降解。室温密闭贮存。
Buffer DE-B:结合液(促使大于70 bp的DNA片段选择性结合到DNA制备膜上)。室温密闭贮存。
Buffer W2 concentrate: 去盐液,使用前,按试剂瓶上指定的体积加入无水乙醇(用100%乙醇或95%乙醇),混合均匀,室温密闭贮存。
Eluent:洗脱液,室温密闭贮存。
二 、注意事项
1. Buffer DE-A、Buffer DE-B 含刺激性化合物,操作时要戴乳胶手套和眼镜,避免沾染皮肤、眼睛和衣服,谨防吸入口鼻。若沾染皮肤、眼睛时,要立即用大量清水或生理盐水冲洗,必要时寻求医疗咨询。
2. 在凝胶回收步骤1中,将凝胶切成细小的碎块可大大缩短凝胶熔化时间(线型 DNA长时间暴露在高温条件下易于水解),从而提高回收率。勿将含 DNA 的凝胶时间地暴露在紫外灯下,减少紫外线对 DNA造成的损伤。
3. 在凝胶回收步骤2中,凝胶必须完全熔化,否则将严重影响 DNA 回收率。
4. 如果回收率较低,可在胶充分溶解后检测pH值,如果pH大于7.5,可向含有DNA的胶溶液中加3M 醋酸钠调节pH至4-6之间。
5. 将 Eluent 或去离子水加热至 65°C,有利于提高洗脱效率。
6. DNA分子呈酸性,建议在 2.5 mM Tris-HCl,pH 7.0-8.5 洗脱液中保存。
7. 回收率低建议:
1)步骤3之后混合液转移至制备管可以放置2-5 min;
2)步骤3之后混合液过柱离心之后将滤液再次重复离心;
3)加热洗脱液温度;
4)洗脱液体积二次重复洗脱。







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