产品信息

储存条件：4℃避光可稳定保存2年，具体批次有效期见外包装

应用范围：细胞骨架染色

产品介绍

鬼笔环肽是从致命的伞形毒蕈蘑菇中分离出来的一种毒素，可特异性结合于F-肌动蛋白的双环肽。因此用荧光染料标记的鬼笔环肽可以非常方便的研究F-肌动蛋白的分布。鬼笔环肽内部，在半胱氨酸和色氨酸之间含有不常见的硫醚桥形成内环结构。在pH升高时，该硫醚被裂解，鬼笔环肽失去对肌动蛋白的亲和力。

YF^®染料是我司开发的一系列新一代荧光染料，与其他荧光染料相比，在亮度，光稳定性和水溶性方面具有综合优势。YF^®荧光染料标记的鬼笔环肽可在纳摩尔水平染色F-肌动蛋白。在各种植物细胞或动物细胞中，标记的鬼笔环肽对大、小细丝具有相似的亲和力，平均每个肌动蛋白亚基结合一个鬼笔环肽分子。不同于抗体，鬼笔环肽与肌动蛋白的结合亲和力在不同物种间没有显着变化。非特异性染色可以忽略不计，染色和未染色区域之间的对比度非常大。鬼笔环肽将单体/聚合物的平衡转向聚合状态，将聚合临界浓度降低至30倍。鬼笔毒肽类（Phallotoxins）可通过抑制细胞松弛素的解聚，碘化钾和升高的温度，稳定F-肌动蛋白。因为鬼笔环肽缀合物很小，大约直径12-15 Å，分子量< 2000 Daltons，多种肌动蛋白结合蛋白，包括肌球蛋白，原肌球蛋白和后肌钙蛋白依然可以和鬼笔环肽标记的肌动蛋白结合。更重要的是，鬼笔环肽标记的肌动蛋白丝保持功能，标记甘油肌纤维仍然收缩，标记的肌动蛋白丝仍然可以继续移动。而且荧光标记的鬼笔环肽也可用于对细胞中F-肌动蛋白进行定量研究。

注意事项

      1. 本染色液的浓度经过优化的，可以满足多种常用细胞（如Hela（人宫颈癌细胞），vero（非洲绿猴肾细胞），ST (猪睾丸细胞)，C2C12（小鼠成肌细胞））的染色需要。如需调整使用浓度，请选择本司YF^®染料/罗丹明标记鬼笔环肽粉末，自行配置合适的工作液浓度。

      2. 避免使用含有甲醇的固定剂，这些会破坏肌动蛋白的结构而影响鬼笔环肽染色效果。

      3. 荧光鬼笔环肽的染色效果与具体的细胞类型、固定/样本制备条件和/或细胞/组织对探针的通透性密切相关。

      4. 用含1% BSA的PBS预孵育固定细胞20-30 min可以改善染色效果。

      5. 荧光标记的鬼笔环肽不具有细胞透性，因此没有被广泛用于活细胞标记。有报道称活细胞可能通过胞饮或未知机制进行标记。一般来说，染色活细胞时需要更多的染料。荧光标记的鬼笔环肽也可被注入到细胞中用于监测肌动蛋白分布和细胞运动。对于本染色液，室温孵育1h无法对活细胞染色。