产品规格

50 μL

储存条件

-20℃避光保存，有效期见外包装

应用范围

实时定量 PCR、高分辨率溶解曲线

产品参数

λabs/λem = 500/530 nm (结合DNA)

λabs = 471 nm (未结合DNA)

产品介绍

AugeGreen是一种用于实时定量PCR（qPCR）的DNA结合染料。该染料的诸多优点使它远胜于SYBR Green I。除了有相似的光谱特性，AugeGreen有三个主要特点使它区别于SYBR Green I。

首先，AugeGreen对PCR的抑制性远小于SYBR Green I。因此，使用AugeGreen进行的 qPCR实验可以使用快速 PCR 步骤。同时，AugeGreen在实验中可以使用较高的浓度，从而获得远强于SYBR Green I扩增信号。较高浓度的AugeGreen也消除了“染料重分布”的缺陷，使 AugeGreen既可用于多重PCR，也可用于高分辨率（高清晰）熔解曲线分析（HRM）。该分析正被越来越多的用于PCR后的基因分型和异源双链分析。由于SYBR Green I对PCR的抑制性，从而要求其使用浓度必须很低，因此SYBR Green I无法解决由低浓度造成的染料重分布问题，既不能用于多重PCR也不能用于 HRM。同时，染料重分布问题也可能影响常规熔解曲线的可靠性，因为低熔点的DNA链可能由于这种原因而无法检测到。

第二，AugeGreen的稳定性极强。在正常的储存、操作和PCR过程中不会被破坏。在缓冲溶液中的染料可以安全的储存在室温或冰箱里，也可以反复冻融。与之相反，SYBR Green I不稳定而且降解后对PCR抑制性更强。

第三，AugeGree降低了细胞膜透性，因而比SYBR Green I 更加安全。独立实验室的测试结果显示，AugeGreen既没有诱变性也没有细胞毒性。相反，虽然SYBR Green I本身诱变性很弱，但它在细胞中可能抑制了正常DNA的修复机制，使其有诱变增强作用。考虑到PCR的广泛使用，其安全性应该足够重视。

注意事项

1. qPCR仪器：对于iCycler的用户，不需要在PCR Mix里面额外添加FAM。由于AugeGreen有轻微的背景荧光，它可以作为充足且稳定的校准基线来使用。对于Roche Light Cycler的用户，如果使用玻璃毛细管进行反应，那么需要在反应体系中额外加入BSA（终浓度~0.5 mg/mL）；如果使用透明的塑料毛细管，则不需要添加BSA。

2. 熔解曲线分析仪器：Rotor-Gene 6000, ABI 7500 FAST, HR1™, 384-well LightScanner™, Roche LightCycler 480, Rotor-Gene 6000, ABI 7500 FAST和Roche LightCycler 480等仪器都可以用于qPCR和熔解曲线的分析。具体参照仪器生产商的使用说明进行数据的采集和分析操作。

3. 扩增片段长度：推荐的DNA扩增长度为50-200 bp，如果需要扩增更长的DNA片段，那么需要适当延长PCR的反应时间。