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  • D-Luciferin, Potassium Salt (D-萤光素钾盐 ,增强型)

    产品货号: D1010S/D1010L

    产品规格: 10 mg/500 mg

    目录价(元):750/3500

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产品概述:

产品参数

外观:可溶于水的浅黄色固体

Ex/Em328/533 nm

 

储存条件

-20℃干燥避光保存,有效期见外包装。

 

产品介绍

活体成像技术(optical in vivo imaging)目前主要采用生物发光(bioluminescence)与荧光(fluorescence)两种技术,生物发光法是基于萤光素酶能催化底物化学发光的原理,将体外能稳定表达萤光素酶的细胞株植入动物体内,与后期注射入体内的底物发生反应,利用光学系统检测光强度,间接反映出细胞数量的变化或细胞的定位。这项技术已被广泛应用于多个领域,最常用的有肿瘤或疾病动物模型的建立,并可用于病毒学研究、siRNA研究、干细胞研究、蛋白质相互作用研究等。

D-Luciferin是萤光素酶(Luciferase)的常用底物,普遍用于整个生物技术领域,特别是体内活体成像技术。在ATP和萤光素酶的作用下,萤光素能够被氧化,并且在560 nm检测到其化学发光。Luciferinluc基因编码,该基因作为报告基因在多种细胞中存在。由于化学发光的低背景性,luc基因在很低的表达水平下就可以被监测到。此外,萤光素/萤光素酶被用来测量10-15摩尔量的ATP。相比于基础版D-萤光素钾盐(D1009),D-萤光素钾盐(增强型)在相同浓度下,底物与萤光素酶反应后发光更强且更持久。

 

使用方法

1. 体外发光检测

1)用314 µL蒸馏水溶解10 mg D-萤光素钾盐,配制成100 mM的储存液(200×)。混匀后立即使用或分装后-20℃冻存。

2)用细胞培养基1:200稀释储存液,配置工作液(终浓度150 μg/mL),即1× D-萤光素钾盐。

3)去除培养细胞的培养基。

4)向细胞内添加适量萤光素工作液,然后进行图像分析(或者细胞放在37℃短时间孵育后检测可增强信号)。

 

2. 活体成像分析

1)用无菌的1× PBS配制D-萤光素钾盐工作液(15 mg/mL),即向10 mg D-萤光素钾盐中,加入667 µL 1×PBS0.2 µm滤膜过滤除菌。使用时,需保持冰冷且避光。

2)参照下表,根据不同的注射方式,注射不同的体积。

3)注射入体内5-10 min后,进行成像分析。


注意事项

注射方式

注射剂量

静脉注射(25-27 gauge针头)

10 μL/g体重浓度,加入相应体积的15 mg/mL萤光素工作液

腹腔注射(25-27 gauge针头)

10 μL/g体重浓度,加入相应体积的15 mg/mL萤光素工作液

肌肉注射(27 gauge针头)

50 μL,浓度为1–2 mg/mL萤光素工作液

鼻内注射(pipette

50 μL,浓度为3 mg/mL萤光素工作液

1. D-Luciferin, Potassium Salt样品的背景荧光主要来源于萤光素,如果不立即使用本产品,建议分装后,-20℃避光保存。 


说明书:


 UE-D1010S/D1010L    

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