产品概述：
产品货号和规格：
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货号 |
产品名称 |
规格 |
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M7405S |
链霉亲和素磁珠（300 nm） |
1 mL, 10 mg/mL, 300 nm |
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M7405M |
10 mL, 10 mg/mL, 300 nm |
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M7406S |
链霉亲和素磁珠（2.8 μm） |
1 mL, 10 mg/mL, 2.8 μm |
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M7406M |
10 mL, 10 mg/mL, 2.8 μm |
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M7407S |
链霉亲和素磁珠（5 μm） |
1 mL, 10 mg/mL, 5 μm |
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M7407M |
10 mL, 10 mg/mL, 5 μm |
储存条件：2-8℃保存，有效期见外包装
产品介绍
链霉亲和素-生物素（SA-Biotin）系统具有极高的结合亲和力（Kd=10^-15），在生物领域具有广泛的应用。Streptavidin 采用蛋白偶联技术将SA共价连接于固相载体表面，可高效结合生物素化抗体、核酸、蛋白等配体分子。本产品采用超顺磁性微球，粒径均一、形貌规整，有利于方便、快捷地捕获目标分子以及实现磁性分离。本产品可配套自动化设备进行高通量操作。表1为磁珠产品信息。
表1. 链霉亲和素磁珠产品信息
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产品信息 |
M7405 |
M7406 |
M7407 |
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粒径 |
300 nm |
2.8 μm |
5 μm |
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生物素化单链寡核苷酸 (24nt)（pmol/mg磁珠） |
≥ 450 |
≥ 300 |
≥ 300 |
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生物素化IgG（μg/mg磁珠） |
≥ 15 |
≥ 10 |
≥ 10 |
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磁珠浓度 |
10 mg/mL |
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磁珠表面 |
亲水基团 |
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保存溶液 |
1×PBS，含0.1%（W/V）BSA，0.1%（V/V）proclin-300 |
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保存条件 |
2-8℃ |
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适用范围
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图例 |
应用方向 |
简述 |
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免疫检测、分离蛋白、 细胞分选等 |
Streptavidin可特异性地结合生物素化抗体或抗原，作为免疫检测、ELISA等固相反应载体，或用于分选细胞等 |
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分离核酸、制备核酸探针等 |
Streptavidin可特异性地结合生物素化的核酸探针，广泛应用于DNA、RNA的杂交实验 |
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DNA-蛋白质相互作用研究 |
Streptavidin可特异性地结合生物素化的靶点DNA或RNA片段，可用于蛋白质与核酸相互作用研究 |
实验步骤
使用前准备
1.缓冲液：以下为常用的缓冲液成分，用户可根据需要调整缓冲液的盐浓度及pH。
2. Buffer I（适用于结合生物素化核酸）：10 mM Tris-HCl（pH 7.5），1 mM EDTA，1 M NaCl，0.01%-0.1% Tween-20。
3. Buffer II（适用于结合生物素化抗体/蛋白）：PBS，pH 7.4，含0.05% Tween-20，可根据需要添加0.01%-0.1% BSA。
4.化学发光Washing buffer：用户根据需求配制洗液，使用时平衡至室温。
5.磁性分离器。
6.漩涡振荡器。
7.旋转混合仪。
8.移液器及吸头。
9.合适的离心管。
结合生物素化核酸
1.将磁珠瓶置于漩涡振荡器上20 s，振荡重悬磁珠。用移液器移取100 μL磁珠到新的离心管中。将离心管置于磁性分离器上，静置1 min（此操作后续简称为磁性分离），用移液器吸去上清液，从磁性分离器上取下离心管。
备注：用户可根据生物素化分子的多少，参考产品信息表中磁珠的载量，计算需要取用的磁珠量。建议生物素化分子的加入量为磁珠载量的1-2倍，使磁珠饱和。
2.加入1 mL Buffer I到离心管中，盖上离心管盖，充分振荡重悬磁珠。磁性分离，移去上清液。
备注：当步骤1取用磁珠体积大于1 mL时，加入与磁珠体积相同的Buffer I。
3.重复步骤2一次。
4. 加入500 μL的用Buffer I稀释的生物素化核酸（使磁珠浓度为2 mg/mL），充分振荡重悬磁珠。将离心管置于旋转混合仪上，室温旋转混合30 min。
5.磁性分离，将上清液转移至新的离心管。
6.按步骤2的方法洗涤磁珠三次。
7.根据后续实验的要求，加入合适的低盐缓冲液，重悬磁珠。至此结合生物素化核酸步骤完成。磁珠可用于后续操作。
8.用户可以通过测定反应前后核酸的浓度，计算结合到磁珠上的核酸量=（反应前浓度-反应后浓度）×反应溶液体积。
结合生物素化抗体/蛋白操作流程
1.将磁珠瓶置于漩涡振荡器上20 s，振荡重悬磁珠。用移液器移取100 μL磁珠到新的离心管中。磁性分离，用移液器吸去上清液，从磁性分离器上取下离心管。
备注：用户可根据生物素化分子的多少，参考产品信息表中磁珠的载量，计算需要取用的磁珠量。建议生物素化分子的加入量为磁珠载量的1-2倍，使磁珠饱和。
2.加入1 mL Buffer II到离心管中，盖上离心管盖，充分振荡重悬磁珠。磁性分离，移去上清液。
备注：当步骤1取用磁珠体积大于1 mL时，加入与磁珠体积相同的Buffer II。
3.重复步骤2两次，共洗涤三次。
4.加入1 mL用Buffer II稀释的生物素化抗体/蛋白（使磁珠浓度为1 mg/mL），充分振荡重悬磁珠。将离心管置于旋转混合仪上，室温旋转混合60 min。
5.磁性分离，将上清液转移至新的离心管。
6.按步骤2的方法洗涤磁珠五次。
根据后续实验的要求，加入Buffer II或其他合适的缓冲液，重悬磁珠。至此结合生物素化抗体/蛋白步骤完成。磁珠可用于后续操作。
磁微粒化学发光免疫诊断操作流程
1.调整磁珠至合适浓度（建议0.2-0.8 mg/mL），将磁珠置于漩涡振荡器上20 s，振荡重悬磁珠。用移液器移取50 μL磁珠至96孔板中，磁性分离，用移液器吸去上清液，从磁性分离器上取下96孔板。
2.每孔加入100 μL生物素化捕获抗体，充分震荡重悬磁珠，37℃恒温箱中孵育15 min后，磁性分离，用移液器吸去上清液，从磁性分离器上取下96孔板。
3.每孔加入200 μL的Washing buffer，充分震荡重悬磁珠，磁性分离，用移液器吸去上清液，从磁性分离器上取下96孔板，该步骤再重复2次，共洗涤3次。
4.每孔加入50 μL待测物标准品或待测样本，充分震荡重悬磁珠，37℃恒温箱中孵育15 min后，磁性 分离，用移液器吸去上清液，从磁性分离器上取下96孔板。
5.每孔加入200 μL的Washing buffer，充分震荡重悬磁珠，磁性分离，用移液器吸去上清液，从磁性 分离器上取下96孔板，该步骤再重复2次，共洗涤3次。
6.每孔加入100 μL酶标记抗体，充分震荡重悬磁珠，37℃恒温箱中孵育15 min后，磁性分离，用移液 器吸去上清液，从磁性分离器上取下96孔板。
7.每孔加入200 μL的Washing buffer，充分震荡重悬磁珠，磁性分离，用移液器吸去上清液，从磁性 分离器上取下96孔板，该步骤再重复2次，共洗涤3次。
8.每孔加入150 μL的底物液，充分震荡重悬磁珠，避光孵育5 min。
9.将96孔板放入化学发光仪读数，并进行相应数据处理
注意事项
1.应避免对磁珠进行冷冻等操作。
2.为减少磁珠损失，每次磁性分离的时间应不少于1 min。
3.从磁珠保存管中移取磁珠前应充分震荡重悬均匀。操作过程中应避免产生气泡。
4.建议使用质量好的移液器吸头和反应管，避免因粘附磁珠及溶液而造成损失。
5.生物素化分子的大小会影响磁珠的载量。用户需要根据实验确定磁珠对特定生物素化分子的载量。
6.生物素化分子的加入量应为磁珠载量的1-2倍，以使磁珠饱和。
7.如需生物素与SA磁珠分离，可采用：
方法一：0.1% SDS，煮沸5 min；
方法二：pH=8.2，含95%甲酰胺的10 mM EDTA中，65℃ 5 min或90℃ 2 min。脱落率95%。
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