产品概述：
产品货号：M7418S, M7418M
产品规格：20 rxns, 100 rxns
储存条件：2~8℃保存，有效期见外包装
产品组分
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组分 |
组分含量 |
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M7418S |
M7418M |
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A.磁珠悬液（UElandy Beads） |
0.4 mL |
2 mL |
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B.裂解液（Buffer LB） |
4.6 mL |
23 mL |
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C.洗涤液I（Washing Buffer I） |
12 mL |
60 mL |
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D.洗脱液（Buffer EB） |
2 mL |
10 mL |
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E.蛋白酶K（Proteinase K） |
0.4 mL |
2 mL |
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F.组织消化液（Buffer TD） |
4 mL |
20 mL |
产品介绍
本品适用于从动物组织中快速、高效地提取DNA。提取过程采用超顺磁性微球特异性的吸附DNA，通过洗涤去除DNA以外的蛋白质等杂质，无需离心操作。本产品既可以手动进行少量样品的提取，也适合于用自动化工作站进行高通量操作。提取的产物可用于酶切、PCR扩增、检测等后续实验。
适用仪器
本试剂盒适用于Thermo KingFisher Flex24等大体积自动化核酸提取仪，也适用于手动提取。
实验步骤
一．自备试剂及耗材
1.80%乙醇
2.异丙醇（分析纯）
3.RNase A (100 mg/mL，选配)
4.1.5 mL离心管：2个/样品
5.单通道移液器：20 μL、200 μL、1000 μL
6.涡漩振荡器
7.恒温金属浴或水浴锅
8.磁性分离器：可选用UE磁性分离器（货号：M7429）
二．首次使用前
在洗涤液I（Washing Buffer I）中缓慢加入指定量（见瓶身标签）的异丙醇（分析纯，需客户自备），并于“□”内打上“√”，混匀后室温保存。
三．样本预处理
取动物组织5-20 mg（肝脏、脾、肺、肾脏＜10 mg），尽量处理成小块，加入200 μL组织消化液（Buffer TD）和20 μL蛋白酶K（Proteinase K），振荡混匀，60℃消化30 min或至样品消化完全，期间振荡混匀数次。
注：样本消化完成后，如果有组织碎片，建议12,000 rpm离心1 min去除残留杂质。
四．手动提取流程
1.取上述处理好的样本200 μL转移至1.5 mL离心管中。加入230 μL裂解液（Buffer LB），振荡混匀，56℃孵育5 min。
2.加入320 μL异丙醇，振荡混匀，加入20 μL磁珠悬液（UElandy Beads），振荡混匀后置于垂直混悬仪上孵育10 min，然后将离心管置于磁性分离器上放置2 min，用移液器移去上清液并取下离心管。
3.加入600 μL洗涤液I（Washing Buffer I）（检查是否已加入异丙醇），振荡混匀1 min，使磁珠充分重悬，将离心管置于磁性分离器上直至溶液澄清，移去上清液并取下离心管。
注：如果需要去除RNA，可重复步骤3并加入2 μL RNase A，涡旋混匀，室温放置10 min。
4.加入600 μL 80%乙醇，振荡混匀1 min，使磁珠充分重悬，将离心管置于磁性分离器上直至溶液澄清，移去上清液并取下离心管。
5.保持离心管于磁性分离器上，室温静置约10 min，即磁珠表面无明显光泽，取下离心管。
注：干燥过程中若发现反应管中有液体残留时，可用小量程移液器吸弃液体。
6.加入50~100 μL洗脱液（Buffer EB），振荡混匀，56℃孵育5 min，将离心管置于磁性分离器上直至溶液澄清，转移上清液至新的离心管中，并于适当条件保存。
五．自动化操作流程
可以适配市面上大部分品牌核酸提取仪，详细参数请联系我司技术支持或设备厂商技术支持。
注意事项
1.操作之前，请务必认真阅读本产品手册。
2.提取效果与样本质量有关，应避免对样本进行反复冻融。
3.应避免对磁珠进行冷冻、离心等操作。
4.磁珠取用前应充分重悬均匀。
5.磁珠干燥前，应用移液器吸尽洗涤液。
6.应避免磁珠过度干燥，否则会严重降低核酸洗脱效率。
7.建议使用质量较好的离心管和移液枪吸头，避免因粘附磁珠而造成损失。
8.若试剂出现沉淀，可于55℃孵育5min。
9.预装板使用前需低速离心，确保溶液聚集在孔底。
10.提取结束后吸取洗脱液时如发现板内壁上有残留洗脱液，也需一起吸取。
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