产品概述：
产品货号：M7423S, M7423L
产品规格：20 rxns, 100 rxns
储存条件：2~35℃保存，有效期见外包装
应用范围：全血、血清、血浆、无细胞体液、病毒保存液、动物组织、唾液、拭子、环境等样本的动物病毒DNA/RNA提取
产品组分
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组分 |
组分含量 |
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M7423S |
M7423L |
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A.磁珠悬液 |
0.4 mL |
2 mL |
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B.裂解液 |
11 mL |
55 mL |
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C.洗涤液I |
12 mL |
60 mL |
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D.洗脱液 |
3 mL |
15 mL |
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E.蛋白酶K |
0.4 mL |
2 mL |
产品介绍
本产品使用超顺磁性微球可以特异性的吸附核酸，通过洗涤去除核酸以外的蛋白质等杂质。洗脱液解离吸附在磁珠上的核酸，分离纯化得到高质量核酸。用于动物病毒核酸的提取、富集、纯化等步骤，提取的产物可用于PCR扩增、检测等后续实验。
适用仪器
本试剂盒适用于TIANGEN TGuide S32、TIANLONG NP968-C、Rosetta 96等自动化核酸提取仪，也适用于手动提取。
实验步骤
一．首次使用前：
在洗涤液I中缓慢加入指定量（见瓶身标签）的异丙醇（分析纯，需客户自备），并于“□”内打上“√”，混匀后2~35℃保存。
二．客户自备物品
1.异丙醇（分析纯）
2. 80%乙醇
3. 1.5 mL离心管：2个/样品
4.单通道移液器：20 μL、200 μL、1000 μL
5.漩涡振荡器
6.垂直混合仪
7.恒温金属浴或水浴锅（55℃）
8.磁性分离器：可选用UE磁性分离器（货号：M7429）
三．操作步骤
1.样本前处理
（1）针对动、植物组织样本：在样本中加入适量PBS或生理盐水，研磨充分，12000 g离心5~10 min，取300 μL上清作为提取样本。
（2）针对粪便样本：在样本中加入适量PBS或生理盐水，混匀后12000 g离心5~10 min，取300 μL上清作为提取样本。
2.手动操作流程
（1）裂解：取一个1.5 mL离心管，加入300μL的样品，再分别加入20 μL的蛋白酶K和550μL的裂解液，以涡旋振荡器最大转速漩涡震荡1 min后，置于60℃条件下反应5 min。
（2）结合：加入20μL的磁珠悬液，以涡旋振荡器最大转速漩涡震荡1 min后，置于60℃条件下反应5 min。然后将离心管置于磁性分离器上放置2 min，用移液器移去上清液并取下离心管。
（3）洗涤并干燥
a. 加入600μL洗涤液I，以涡旋振荡器最大转速漩涡震荡2 min，再将离心管置于磁性分离器上直至溶液澄清，移去上清液并取下离心管。
b. 加入600μL洗涤液I，以涡旋振荡器最大转速漩涡震荡1 min，再将离心管置于磁性分离器上直至溶液澄清，移去上清液并取下离心管。
c. 加入600μL 80%乙醇，以涡旋振荡器最大转速漩涡震荡1 min，将离心管置于磁性分离器上直至溶液澄清，移去上清液并保持离心管于磁性分离器上，于室温下静置2 min后，至磁珠表面无明显光泽，取下离心管。
注意：干燥过程中若发现反应管中有液体残留时，可用小量程移液器吸弃液体。
（4）洗脱：加入50~100 μL洗脱液，涡旋震荡2 min或用移液器缓慢吹打磁珠，使磁珠充分重悬。然后于60℃下加热3 min，将离心管置于磁性分离器上直至溶液澄清，转移上清液至新的1.5 mL离心管中，此即为纯化得到的核酸，可保存于-20℃。
注意事项
1. 操作之前，请务必认真阅读本产品手册。
2. 应避免对磁珠进行冷冻、离心等操作。
3. 磁珠取用前应充分重悬均匀。
4. 磁珠干燥前，应使用移液器吸尽洗涤液。
5. 应避免磁珠过度干燥，否则会严重降低核酸洗脱效率。
6. 建议使用质量较好的离心管和移液器吸头，避免因粘附磁珠而造成损失。
7. 使用前请检查各组分是否存在析出情况，如有析出，请将试剂瓶置于60℃水浴加热溶解后使用。
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