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  • M7425 唾液基因组提取试剂盒

    产品货号: M7425S, M7425M

    产品规格: 20 rxns, 100 rxns

    目录价(元):

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产品概述:

产品货号:M7425S, M7425M

产品规格:20 rxns, 100 rxns

储存条件:2~8℃保存,可在常温下短时间储存,有效期见外包装

应用范围:各种唾液、拭子保存液等液体样品的基因组提取


产品组分

组分

组分含量

M7425S

M7425M

A.磁珠悬液

1 mL

5 mL

B.裂解液

4 mL

20 mL

C.洗涤液I

24 mL(首次使用前请加入24 mL无水乙醇)

120 mL(首次使用前请加入120 mL无水乙醇)

D.洗涤液II

6 mL(首次使用前请加入14 mL无水乙醇)

30 mL(首次使用前请加入70 mL无水乙醇)

E.洗脱液

4 mL

20 mL

F.蛋白酶K

4 mg(首次使用前请加入0.4 mL溶液A)

20 mg(首次使用前请加入2 mL溶液A)

G.溶液A

0.4 mL

2 mL


产品介绍

本产品使用超顺磁性微球可以特异性的从唾液内吸附DNA,通过洗涤去除DNA以外的蛋白质等杂质。洗脱液解离吸附在磁珠上的DNA,分离纯化得到高质量核酸。


适用仪器

本试剂盒适用于TIANGEN TGuide S32, TIANLONG NP968-C,Thermo KingFisher Flex24等大体积自动化核酸提取仪,也适用于手动提取。


实验步骤

一. 手动操作流程

1. 客户自备物品

(1)异丙醇(分析纯)

(2)无水乙醇(分析纯)

(3)1.5 mL离心管、2 mL离心管:2个/样品


(4)单通道移液器:200 μL、1000 μL

(5)漩涡振荡器

(6)垂直混合仪

(7)恒温金属浴或水浴锅

(8)磁性分离器

2.操作步骤(以400 μL样本量为例)

(1)唾液样本裂解

a.向1.5 mL离心管中加入400 μL唾液样本(若样本体积不足400 μL,请加入唾液保存液补齐至400 μL)、20μL蛋白酶K溶液、以及200 μL裂解液,涡旋混匀。

注意:裂解液低温情况下可能出现沉淀,可于37℃加热2 min融化。

b.将离心管与55℃温浴10 min,期间每隔5 min摇晃混均一次,完毕后低速瞬离使管盖以及管壁上液体集中到官底,待用。

(2)结合:向上述离心管中加入350 μL异丙醇,再加入50 μL磁珠悬液,涡旋震荡3 min混匀后静置2 min。

(3)磁性分离:将离心管置于磁力架上静置20 s至磁珠吸附完全;如果离心管内盖有磁珠,可保持EP管在磁力架上,整体上下颠倒2-3次至磁珠完全吸附。保持EP管固定于磁力架上,用移液枪吸弃上清液,期间避免接触磁珠。

(4)洗涤1:向1.5mL离心管中加入800 μL洗涤液I,将1.5mL离心管从磁力架上取下,用移液枪吹散磁珠,涡旋震荡2 min,磁性分离(参照步骤3)操作),再重复此操作1次。

(5)洗涤2:使用800 μL洗涤液II,(参照步骤(4)操作)。

(6)干燥:保持离心管于磁性分离器上,于是室温下开盖静置10 min后,取下离心管。

注意:干燥过程中若发现反应管中有液体残留时,可用小量程移液器吸弃液体。

7)洗脱:加入100 μL洗脱液 ,涡旋震荡1 min或用移液器缓慢 吹打磁珠50次,使磁珠充分悬浮,于65℃加热10 min后,将离心管置于磁性分离器上直至溶液澄清,转移上清液至新的1.5 mL离心管中,此即为纯化得到的唾液DNA,可保存于-20℃。

二、自动化操作流程

可以适配市面上大部分品牌核酸提取仪,详细参数请联系我司技术支持或设备厂商技术支持。


注意事项

1.操作之前,请务必认真阅读本产品手册。

2.唾液样品的质量对产物DNA的纯化量有较大影响,应避免反复冻融唾液样品。

3.蛋白酶K干粉溶解后,可分装储存于-20℃,但应避免反复冻融。

4.应避免对磁珠进行冷冻、离心等操作。

5.磁珠取用前应充分重悬均匀。

6.磁珠干燥前,应使用移液器吸尽洗涤液。

7.应避免磁珠过度干燥,否则会严重降低核酸洗脱效率。

8.建议使用质量较好的离心管和移液器吸头,避免因粘附磁珠而造成损失。

9.在96孔板中进行磁性分离操作时,磁珠吸附时间可适当延长。

10.使用前请检查各组分是否存在析出情况,如有析出,请将试剂瓶置于60℃水浴加热溶解后使用。


说明书:


 UE-M7425S, M7425M    

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2号技术热线 185512967694号技术热线 18100698384

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