产品概述：
产品货号：M7428S, M7428M
产品规格：20 rxns, 100 rxns
储存条件：RNase A保存于-20℃（可短期常温保存或运输），其他试剂2~35℃保存，有效期见外包装
产品组分
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组分 |
组分含量 |
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M7428S |
M7428M |
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A.磁珠悬液 |
0.3 mL |
1.5 mL |
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B.裂解液 |
12 mL |
60 mL |
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C. RNaseA |
60 μL |
300 μL |
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D.结合液 |
12 mL |
60 mL |
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E.洗涤液I |
24 mL |
120 mL |
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F.洗涤液II |
4.8 mL |
24 mL |
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G.洗脱液 |
2 mL |
10 mL |
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H.蛋白酶K |
0.3 mL |
1.5 mL |
产品介绍
本产品适用于从植物样本中快速、高效地提取DNA。提取过程采用超顺磁性微球，无需离心操作；使用预制的缓冲液，可直接进行提取，且可根据加入的样本量来调整反应体系。本产品既可以手动进行少量样品的提取，也适合于用自动化工作站进行高通量操作。提取的产物可用于酶切、PCR扩增、检测等后续实验。
实验步骤
一．首次使用前
1. 在洗涤液Ⅱ中加入指定量（见管身标签）的无水乙醇，并于“□”内打上“√”，混匀后需保存于2~8℃或室温。
2. 若裂解液有沉淀可将其置于55℃孵育5~10 min使沉淀完全溶解混匀。
二．自备试剂及耗材
1.无水乙醇
2.EP管（1.5mL离心管，3个/样品）
3.单通道移液器：20 μL、200 μL、1000 μL
4.涡旋震荡器、恒温金属浴（或水浴锅）
5.磁性分离器：可选用UE磁性分离器（货号：M7429）
三．实验操作
植物样本研磨（以100 mg样本量为例）
1. 取足量新鲜植物样本或冻存样本，加入液氮充分研磨。
2.裂解：向1.5mL离心管中加入50~100 mg研磨的植物样本，依次加入600 μL裂解液、3 μL RNaseA溶液、15 μL蛋白酶K，调整合适的转速漩涡振荡1 min，充分混合后室温静置15 min。13000 rpm离心5min，转移300 μL上清至新的1.5mL离心管中。
3.结合：向上述离心管中依次加入600 μL结合液、15 μL磁珠悬液 ，震荡混匀30 s，室温结合5 min，期间颠倒混匀两次，然后将离心管置于磁性分离器上直至溶液澄清，用移液器移去上清液并取下离心管。
注：此步骤磁性分离时间应不少于2 min。
4.洗涤I：向1.5 mL离心管中加入600 μL洗涤液I，震荡混匀30 s，将离心管置于磁性分离器上直至溶液澄清，用移液器移去上清液并取下离心管。再重复此操作1次。
5.洗涤II：将1.5 mL离心管从磁力架上取下，加入600 μL洗涤液II，涡旋震荡30s，将离心管置于磁性分离器上直至溶液澄清，用移液器移去上清液并取下离心管。再重复此操作1次。
6.干燥：保持离心管于磁性分离器上，将其置于室温中风干至磁珠表面无明显光泽（10 min），取下离心管。
注：干燥过程中若发现反应管中有液体残留时，可用小量程移液器吸弃液体。
7.洗脱：加入50~100 μL 65℃预热的洗脱液，震荡混匀30 s，于65℃加热5 min后，将离心管置于磁性分离器上直至溶液澄清，转移上清液至新的1.5 mL离心管中，此即为纯化得到的植物DNA，可保存于-20℃。
注意事项
1.操作之前，请务必认真阅读本产品手册。
2.提取效果与样本质量有关，应避免对样本进行反复冻融。
3.应避免对磁珠进行冷冻、离心等操作。
4.磁珠取用前应充分重悬均匀。
5.磁珠干燥前，应用移液器吸尽洗涤液。
6.应避免磁珠过度干燥，否则会严重降低核酸洗脱效率。
7.建议使用质量较好的离心管和移液枪吸头，避免因粘附磁珠而造成损失。
8.若试剂出现沉淀，可于55℃溶解5 min。
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