产品货号：MAG-BL-GDNA-50，MAG-BL-GDNA-250

产品规格：50 rxns，250 rxns

储存条件：PK Soln 2-8℃保存12个月，-20℃长期保存，其它组分室温保存12个月。

运输条件：常温运输

应用范围：适用于从抗凝全血或血液白膜层样本中提取高纯度基因组DNA

产品组分

*注：

1）MB Mix G取用前充分摇晃或震荡，使磁珠悬浮均匀；

2）Buffer DW2为浓缩溶液，使用前请按照瓶身标签提示加入无水乙醇进行稀释

产品介绍

本产品使用超顺磁性微球可以特异性的吸附核酸，通过洗涤去除核酸以外的蛋白质等杂质。洗脱液解离吸附在磁珠上的核酸，分离纯化得到高质量核酸。

适用仪器

本试剂盒适用于BIO-DL 32, TIANGEN TGuide S32, TIANLONG NP968-C, Rosetta 96等自动化核酸提取仪，也适用于手动提取。

操作步骤

一．首次使用前：

客户自备物品：异丙醇（分析纯）、80%乙醇

二.样本前处理：

1.向2 mL离心管中加入25 μL PK Soln。

2.加入250 μL抗凝全血样本至上述离心管。

注：禽类抗凝血液，取5~10 μL并加入去离子水补足至250 μL，再进行下一步实验。

3. 加入250 μL Buffer ABL，高速涡旋10秒，70℃振荡温浴15分钟，短暂离心后冷却至室温。

注：若有条件可以使用振荡金属浴，可预先将步骤4中20 μL MB Mix G加入到这一步骤，带着磁珠进行振荡混匀裂解有利于提高DNA得量。

4. 向离心管中分别加入20 μL MB Mix G（提前混合均匀）和350 μL异丙醇，涡旋振荡5~10分钟。按【纯化步骤】继续进行后续操作。

注1)：基因组DNA量较多，有可能出现磁珠聚集现象，为正常现象；

注2)：MB Mix G与异丙醇可预选混合。

三．纯化步骤:手动法

1. 短暂离心，将离心管置于磁力架上静置30秒。待磁珠完全吸附后，用移液器吸弃管内液体。

2. 向离心管中加入500 µL Buffer BW1，1,000 rpm涡旋振荡3分钟，磁性分离，吸弃上清液。

重复上述步骤1次。

3. 加入700 μL Buffer DW2（已用乙醇稀释），1,000 rpm涡旋振荡2分钟，磁性分离，吸弃上清液。

4. 重复上述步骤1次。

5. 将离心管继续保持在磁力架上，放入45~50℃烘箱中，干燥约10分钟至无明显乙醇气味（也可室温晾干，但需要更长时间）。

6. 挥发除醇结束后，向离心管中加入50~100 μL Buffer EB，吹散或振散磁珠，58℃振荡温浴6分钟。磁性分离，将洗脱液转移至另一干净离心管中，得DNA产物，保存于-20℃。

四．自动化操作流程

1.将Sample Plate中加入350 μL异丙醇和20 μL MB Mix G（可预先混合）；

2.在Sample Plate中加入525 μL全部裂解上清液；

3.将96位磁棒套放入到Wash 3 Plate中（必须准确放入，否则可能损坏磁棒套。此步骤为针对KingFisher Flex，若使用其它品牌仪器请做相应调整）。

4.将试剂板按对应顺序放入核酸提取仪中，运行程序。

5.程序运行完毕，转移Elute Plate中DNA至新离心管中，提取过程结束。

注：若样本前处理步骤中选择带着磁珠进行样本裂解，则该步骤无需再加入磁珠。

【推荐96位核酸提取仪程序参数】

备注：不同品牌核酸提取仪可根据实际情况调整相应的参数。