产品概述:
产品货号:MAG-PCR-50,MAG-PCR-250
产品规格:50 rxns、250 rxns
运输条件:常温运输;
保存条件:室温保存12个月。
应用范围:适用从PCR产物、酶促反应液以及粗制DNA回收高纯度DNA。
产品组分
组分 |
MAG-PCR-50 |
MAG-PCR-250 |
MB Mix |
0.5mL |
2.5 mL |
Buffer PB |
50 mL |
250 mL |
Buffer EB |
10 mL |
50 mL |
产品介绍
本产品专为从PCR产物、酶促反应液或粗制DNA中快速、轻松地分离50bp~20kb DNA片段而设计,可获得极高的DNA浓度。试剂盒采用了磁性纳米颗粒固相核酸富集技术,精选高性能纳米磁珠,配合精心研制的Buffer体系组合而成,有效去除蛋白质、有机化合物、无机盐离子以及寡核苷酸引物等杂质,最后使用低盐缓冲液洗脱获得纯化的DNA。使用本产品纯化得到的DNA可以直接用于酶切、PCR、RT-PCR、文库构建、Southern Blot、分子标记、NGS等下游分子生物学实验。
适用仪器
适用于基于磁转移技术的32位或96位核酸提取仪。如BIO-DL 32,TIANGEN TGuide S32,TIANLONG NP968-C,Rosetta 96等自动化核酸提取仪,也适用于手动提取。
实验步骤
一.首次使用前:
1.自备试剂:异丙醇(AR)、80%乙醇(AR)
操作步骤
1.加入适量的PCR产物或酶促反应产物或粗DNA至1.5或2.0mL离心管中。
a)回收>100bp片段,加入5倍体积Buffer PB;
b)回收≤100bp片段,加入5倍体积Buffer PB和2倍体积的异丙醇;
注:a.向50μL PCR产物中加入250μL的Buffer PB;
b.向50μL PCR产物中加入250μL的Buffer PB和100μL异丙醇。
2.加入10μL MB Mix,振荡涡旋5分钟。
3.短暂离心,将离心管内液体收集至底部,然后将离心管置于磁力架上静置30秒,待磁珠完全吸附后,用移液器吸弃管内液体。
4.加入500µL Buffer PB,1,000rpm涡旋振荡2分钟,磁性分离,吸弃上清液。
5.加入700µL 80%乙醇,1,000rpm涡旋振荡2分钟,磁性分离,吸弃上清液。
6.瞬时离心,重复上述步骤1次。
7.将离心管继续保持在磁力架上,放入45~50℃烘箱中,干燥约10分钟至无明显乙醇气味(也可室温晾干,约15分钟)。
8.挥发除醇结束后,向离心管中加入40~80µL Buffer EB,吹散或振散磁珠,56℃振荡温浴5分钟。磁性分离,将洗脱液转移至另一干净离心管中,得DNA产物,保存于-20℃。