产品概述:
本试剂盒采用SDS碱裂解法,结合DNA制备膜选择性吸附DNA。同时采用内毒素去除柱有效去除内毒素,可从80-200 ml (OD600 为1-1.5)细菌培养物中提取出多至600 μg 高纯度质粒 DNA,其内毒素水平控制在0.1 EU/μg 以下。
一、 试剂盒组成、贮存、稳定性
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Cat. No. |
UE-MX-EP-V2-5 |
UE-MX-EP-V2-25 |
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Kit size |
5 preps |
25 preps |
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Maxiprep column |
5 |
25 |
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Endotoxin-Removal column |
5 |
25 |
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RNase A |
135µI |
700µI |
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Buffer S1 |
70ml |
285ml |
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Buffer S2 |
70ml |
285ml |
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Buffer S3K |
70ml |
285ml |
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Buffer B |
70ml |
285ml |
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Buffer W1 |
80ml |
350ml |
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Buffer W2 concentrate |
33ml |
150ml |
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Eluent A |
15ml |
70ml |
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Protocol manual |
1 |
1 |
RNase A: 50 mg/ml,室温可贮存6个月,长期贮存于-20°C。
Buffer S1:细菌悬浮液。加入RNaseA后,混合均匀,4°C贮存。
Buffer S2:细菌裂解液(含SDS/NaOH),室温密闭贮存。
Buffer S3K:中和液,室温密闭贮存。
Buffer B: DNA结合溶液,室温密闭贮存。
Buffer W1:洗涤液,室温密闭贮存。
Buffer W2 concentrate:去盐液。使用前,按试剂瓶上指定的体积加入无水乙醇(可用无水乙醇或95%乙醇)。混合均匀,室温密闭贮存。
Eluent A:洗脱液。室温密闭贮存。
二、注意事项
1. 细菌过量将影响细菌裂解和质粒DNA释放,导致内毒素含量过高。
2. 步骤3和步骤4的操作必须温和。剧烈摇晃将导致基因组DNA的污染。但混合必须充分,否则影响得率。
3. 在加入Buffer S3K时,蛋白质和基因组DNA形成粘稠的白色絮状沉淀,必须充分混合均匀,使凝集块中间也得到充分中和凝结。
4. Buffer S2、Buffer S3K、Buffer B和Buffer W1含刺激性化合物,操作时要戴乳胶手套和防护眼镜,避免沾染皮肤、眼睛和衣物,谨防吸入口鼻。若沾染到皮肤或眼睛,要立即用大量清水或生理盐水冲洗,必要时寻求医疗咨询。







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