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  • 通用型 DNA 纯化回收试剂盒

    产品货号: UE-GX/PCR-10 / UE-GX/PCR-50 / UE-GX/PCR-250

    产品规格: 10T/50T/250T

    目录价(元):75/311 /1387

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产品概述:

本试剂盒适合从琼脂糖凝胶中回收DNA(70 bp-10 kb),回收量多至8 μg,回收率为60~85%,琼脂糖凝胶在温和的缓冲液中熔化,其中保护剂能防止线状DNA在高温下降解,然后在结合缓冲液作用下使DNA选择性的结合到膜上。纯化的DNA纯度高,并保持片段完整性和高生物活性,可直接用于连接、体外转录、PCR扩增、测序、微注射等分子生物学实验。

同时本试剂盒可以直接用于PCR产物、酶促反应、测序反应的反应液中提取DNA(大于75 bp),提取多至8 μg,回收率为70~90%,纯化的DNA不含引物、酶蛋白及单核苷酸。

 

一、 试剂盒组成、贮存、稳定性

Cat. No.

UE-GX/PCR-10

UE-GX/PCR-50

UE-GX/PCR-250

Kit size

10 preps

50 preps

250 preps

Miniprep column C15

10

50

250

2 ml Microfuge tube

10

50

250

1.5 ml Microfuge tube

10

50

250

Buffer A

6 ml

28 ml

145 ml

Buffer DE-A

12 ml

50 ml

230 ml

Buffer PCR-B

12 ml

50 ml

230 ml

Buffer W2 concentrate

5 ml

24 ml

2×72 ml

Eluent

1 ml

5 ml

25 ml

Protocol manual

1

1

1


Buffer A:制备管活化处理液,室温密闭贮存。

Buffer DE-A:凝胶熔化剂,含 DNA 保护剂,防止 DNA在高温下降解。室温密闭贮存。

Buffer PCR-B:结合液(促使大于 70 bp 的 DNA 片段选择性结合到 DNA制备膜上)。室温密闭贮存。

Buffer W2 concentrate:去盐液,使用前,按试剂瓶上指定的体积加入无水乙醇(用100%乙醇或95%乙醇),混合均匀,室温密闭贮存。

Eluent:洗脱液,室温密闭贮存。

 

二、注意事项

1. Buffer DE-A(含有β-巯基乙醇)、Buffer PCR-B 含刺激性化合物,操作时要戴乳胶手套和眼镜,避免沾染皮肤、眼睛和衣服,谨防吸入口鼻。若沾染皮肤、眼睛时,要立即用大量清水或生理盐水冲洗,必要时寻求医疗咨询。

2. 在凝胶回收步骤2中,将凝胶切成细小的碎块可大大缩短凝胶熔化时间(线型 DNA长时间暴露在高温条件下易于水解),从而提高回收率。勿将含 DNA 的凝胶时间地暴露在紫外灯下,减少紫外线对 DNA造成的损伤。

3. 在凝胶回收步骤3中,凝胶必须完全熔化,否则将严重影响 DNA 回收率。

4. 如果回收率较低,可在胶充分溶解后检测pH值,如果pH大于7.5,可向含有DNA的胶溶液中加3M 醋酸钠调节pH至4-6之间。

5.  Eluent 或去离子水加热至65°C,有利于提高洗脱效率。

6. DNA分子呈酸性,建议在 2.5 mM Tris-HCl,pH 7.0-8.5 洗脱液中保存。

7. 回收率低建议:

1)混合液转移至吸附柱可以放置2-5 min;

2)混合液过柱离心之后将滤液再次重复离心;

3)加热洗脱液温度;

4)洗脱液二次重复洗脱。

 

三、实验准备

1.  第一次使用前,Buffer W2 concentrate中加入指定体积的无水乙醇。

2.  准备无核酸和核酸酶污染的Tip头、离心管。

3.  准备75°C水浴。

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