产品概述:
本试剂盒采用独特的细胞裂解和血红素/蛋白沉淀技术,结合DNA制备膜选择性地吸附DNA 的方法达到纯化基因组DNA 的目的。200-250 μl的抗凝全血中获得多至12 μg的基因组DNA。
一 、试剂盒组成、贮存、稳定性
Cat.No. |
UE-MN-BL-GDNA-10 |
UE-MN-BL-GDNA-50 |
UE-MN-BL-GDNA-250 |
Kit size |
10 preps |
50 preps |
250 preps |
Miniprep column |
10 |
50 |
250 |
2 ml Microfuge tube |
10 |
50 |
250 |
1.5 ml Microfuge tube |
10 |
50 |
250 |
Buffer AP1 |
6 ml |
30 ml |
150 ml |
Buffer AP2 |
2 ml |
6 ml |
30 ml |
Buffer W1A concentrate |
5 ml |
24 ml |
120 ml |
Buffer W2 concentrate |
5 ml |
24 ml |
2×72 ml |
Buffer TE |
3 ml |
11 ml |
60 ml |
Protocol manual |
1 |
1 |
1 |
Buffer AP1:细胞裂解液,室温密闭贮存。
Buffer AP2:蛋白沉淀液,室温密闭贮存。
Buffer W1A concentrate:洗涤液。使用前,按试剂瓶上指定的体积加入无水乙醇(可用100%乙醇或 95%乙醇)。混合均匀,室温密闭贮存。
Buffer W2 concentrate:去盐液。使用前,按试剂瓶上指定的体积加入无水乙醇(可用100%乙醇或 95%乙醇)。混合均匀,室温密闭贮存。
Buffer TE:5 mM Tris-HCI,0.1 mM EDTA,pH 8.5。室温密闭贮存。
二、注意事项
1. 如果从鸟类、两栖类或更低级的动物中提取基因组DNA,因其血液中红细胞有核,血液用量勿超过10 μl,并加 PBS 溶液将血样体积稀释到250 μl后再按正常步骤操作。
2. 制备管可结合多至25 μg 的基因组 DNA。 若需更多的基因组DNA,可用0.5 ml 血来提取基因组DNA。将0.5 ml血样分成两管,每管250 μl, 按步骤1至4制备提取。将步骤4所得到的上清混合,加到同一个制备管中结合基因组DNA,最后用100-200 μl的 Buffer TE洗脱基因组DNA。
3. Buffer AP1和 Buffer W1A 含刺激性化合物,操作时要戴乳胶手套和眼镜,避免沾染皮肤、眼睛和衣服,谨防吸入口鼻。若沾染皮肤、眼睛时,要立即用大量清水和生理盐水冲洗,必要时寻求医疗咨询。
4. 为了保持基因组DNA的性能的完整性以及PCR 扩增的特异性,纯化的基因组DNA应用含有0.1 mM EDTA的低盐浓度的Tris 缓冲液洗脱和贮存。