产品概述:
产品介绍
Western Blot(WB)是一种基于抗原抗体特异性结合的检测技术,广泛用于检测生物样品中的特定蛋白质。其原理是通过SDS-PAGE电泳分离蛋白质后,将蛋白质转移到固相膜(如PVDF或硝酸纤维素膜)上,再利用特异性抗体进行检测。该方法结合了电泳的高分辨率和免疫检测的高特异性,可实现对目标蛋白的定性和半定量分析。
蛋白质转印在免疫印迹分析中是重要的一环,通过将蛋白质转印到滤膜表面,经抗体结合、酶标或荧光素标记,可实现检测目标蛋白的目的。UE的PVDF(聚偏二氟乙烯)转印膜具有极高的蛋白结合能力,在蛋白质转移过程中捕获率高,能够最大程度减少样品损失,使得最终信号易于检测。
转印原理是利用带负电蛋白(SDS结合)通过电场驱动从负极到正极转移和蛋白质与膜材料之间疏水性结合,从而实现蛋白条带从PAGE凝胶转印至PVDF膜的目的,见图1。
图1. 转印原理示意图
应用范围
蛋白质印迹;核酸印记;点/ 狭缝印迹;氨基酸分析;N 端蛋白质测序 ;糖蛋白可视化;脂多糖分析蛋白定量等
产品信息
货号 |
名称 |
规格 |
UEL-PF0022 |
PVDF,0.22μm,265mm*3750mm |
1卷 |
UEL-PF0022S |
PVDF,0.22μm,60mm*90mm |
100片/盒 |
UEL-PF0022M |
PVDF,0.22μm,140mm*160mm |
50片/盒 |
UEL-PF0022L |
PVDF,0.22μm,200mm*250mm |
20片/盒 |
UEL-PF0045 |
PVDF,0.45μm,265mm*3750mm |
1卷 |
UEL-PF0045S |
PVDF,0.45μm,60mm*90mm |
100片/盒 |
UEL-PF0045M |
PVDF,0.45μm,140mm*160mm |
50片/盒 |
UEL-PF0045L |
PVDF,0.45μm,200mm*250mm |
20片/盒 |
储运条件
未使用的PVDF 膜应密封保存,避免受潮,避免高温或低温环境,避免长时间光照。常温运输。有效期见外包装。
产品特点
强蛋白结合能力,保证转印效率;
低背景干扰,提高实验结果清晰度;
表面均匀平整,孔径均一,条带清晰平整;
高机械强度,高化学和热稳定性,确保实验环境适应性;
易于抗体重复剥离和杂交。
注意事项
1. 本产品仅限于科研,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
2. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
自备材料
1. 耗材
转印结构;滤纸;电泳仪;转膜槽等
2. 试剂
转膜液(UE可提供W6174,Western 免冰浴快速转膜液(10×));甲醇/乙醇;超纯水等
操作步骤
1. 选型
选择合适孔径的PVDF膜;
裁剪或使用合适大小的PVDF膜。
*根据目的蛋白的分子量选择,0.45 μm 孔径膜适合 >20 kDa 蛋白质,0.22 μm 孔径膜适合 <20 kDa 蛋白质。
2. 预处理
预先用甲醇进行浸泡活化30 s 左右,直至膜由不透明为半透明,随后需放入转印缓冲液中平衡至少5 min。
*PVDF膜一定要充分浸泡活化,否则会影响转印效果,进而导致结果重复性差和数据不可信。
3. 安装
确保PVDF 膜与凝胶之间紧密贴合,没有气泡,各层之间平整对齐。
*PVDF膜由气泡会导致蛋白条带不平整;“三明治”转膜结构不紧密,可能会导致条带无法转印到PVDF膜上,条带弥散甚至消失。
*可以通过丽春红染色液(UE货号:P6176,丽春红染色液(1×))染色PVDF膜,验证转膜情况。
关联产品
产品货号 |
产品名称 |
R6166 |
RIPA裂解液(强,无抑制剂) |
W6001 |
Western及IP细胞裂解液 |
S6182 |
PAGE彩色快速凝胶制备试剂盒(10%) |
S6183 |
PAGE彩色快速凝胶制备试剂盒(12.5%) |
S6181 |
PAGE彩色快速凝胶制备试剂盒(7.5%) |
S6184 |
PAGE彩色快速凝胶制备试剂盒(15%) |
P6163 |
蛋白酶抑制剂混合液(EDTA-Free,100×in DMSO) |
S6168 |
SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(变性,非还原,5×) |
B6167 |
BCA蛋白定量检测试剂盒 |
B6169 |
BCA蛋白定量检测试剂盒(即用型) |
H6161 |
HRP Goat Anti-Mouse IgG(H&L)(HRP羊抗鼠二抗) |
H6162 |
HRP Goat Anti-Rabbit IgG(H&L)(HRP羊抗兔二抗) |
S6009 |
Super ECL Plus(超敏化学发光检测试剂盒) |
S6008 |
Super ECL Prime(灵敏化学发光检测试剂盒) |
S6010 |
Super ECL Star(特超敏化学发光检测试剂盒) |
P6220 |
彩色预制蛋白Marker(25-400 kDa,四色) |
P6221 |
彩色预染蛋白Marker(25-300 kDa,三色) |
P8028 |
彩色预染蛋白Marker(10-250kDa,双色) |
P6222 |
彩色预染蛋白Marker(10-250 kDa,三色) |
P6110 |
彩色预染蛋白Marker(10-180 kDa,三色) |
P6224 |
彩色预染蛋白marker(2.7-40kda,三色) |
PM0409 |
彩色预染蛋白Marker (10-270 kDa,四色) |
PM0511 |
彩色预染蛋白Marker (10-270 kDa,五色) |
K8006 |
考马斯亮蓝快速染色液(免脱色) |
W6174 |
Western 免冰浴快速转膜液(10×) |
P6176 |
丽春红染色液(1×) |