产品概述:
本试剂盒适合从各种琼脂糖凝胶中回收多至20 μg DNA(100 bp-15 kb),回收率为60-85%。琼脂糖凝胶在温和的缓冲液(DE-A溶液)中熔化,其中的保护剂能防止线状DNA在高温下降解,然后在DE-B溶液的作用下使DNA选择性结合到膜上。纯化的DNA纯度高,并保持片断完整性和高生物活性,可直接用于连接、体外转录、PCR扩增、测序、微注射等分子生物学实验。
一 、试剂盒组成、贮存、稳定性
Cat.No.
UE-MX-GX-10
UE-MX-GX-50
UE-MX-GX-250
UE-MX-GX-500
Kit size
10 preps
50 preps
250 preps
500 preps
Miniprep column B10 B10
10
50
250
500
2 ml Collection tube
10
50
250
500
Buffer DE-A
14 ml
2×33 ml
2×165 ml
2×330 ml
Buffer DE-B
7 ml
33 ml
165 ml
330 ml
Buffer W1
6 ml
28 ml
145 ml
280 ml
Buffer W2 concentrate
5 ml
24 ml
2×72 ml
2×120 ml
Eluent
1 ml
5 ml
25 ml
50 ml
Protocol manual
1
1
1
1
Buffer DE-A:凝胶熔化剂,含DNA保护剂,防止DNA在高温下降解。室温密闭贮存。
Buffer DE-B:结合液(促使大于70 bp的DNA片段选择性结合到DNA吸附柱膜上)。室温密闭贮存。
Buffer W1:洗涤液,室温密闭贮存。
Buffer W2 concentrate:去盐液,使用前,按试剂瓶上指定的体积加入无水乙醇(用100%乙醇或95%乙醇),混合均匀,室温密闭贮存。
Eluent:洗脱液,室温密闭贮存。
二、注意事项
1. Buffer DE-A(含有β-巯基乙醇)、Buffer DE-B 含刺激性化合物,操作时要戴乳胶手套和眼镜,避免沾染皮肤、眼睛和衣服,谨防吸入口鼻。若沾染皮肤、眼睛时,要立即用大量清水或生理盐水冲洗,必要时寻求医疗咨询。
2. 在凝胶回收步骤1中,将凝胶切成细小的碎块可大大缩短凝胶熔化时间(线型 DNA长时间暴露在高温条件下易于水解),从而提高回收率。勿将含 DNA 的凝胶时间地暴露在紫外灯下,减少紫外线对 DNA造成的损伤。
3. 在凝胶回收步骤2中,凝胶必须完全熔化,否则将严重影响 DNA 回收率。
4. 如果回收率较低,可在胶充分溶解后检测pH值,如果pH大于7.5,可向含有DNA的胶溶液中加3M 醋酸钠调节pH至4-6之间。
5. 将 Eluent 或去离子水加热至 65°C,有利于提高洗脱效率。
6. DNA分子呈酸性,建议在 2.5 mM Tris-HCl,pH 7.0-8.5 洗脱液中保存。
7. 回收率低建议:
1)步骤3之后混合液转移至吸附柱可以放置2-5 min;
2)步骤3之后混合液过柱离心之后将滤液再次重复离心;
3)加热洗脱液温度;
4)洗脱液体积二次重复洗脱。







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